Development of Separation Methods for GLP-1 Synthetic Peptides Utilizing a Systematic Protocol and MaxPeak High Performance Surface Technology

Význam tématu

Peptidové léky, zejména agonisté GLP-1, představují rostoucí třídu léčiv pro léčbu obezity a diabetes 2. typu díky vyšší specifitě a nízké imunogenicitě. Zajištění citlivé, reprodukovatelné a rychlé kontrolní analýzy těchto syntetických peptidů je klíčové pro bezpečnost a kvalitu farmaceutických produktů.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo vyvinout univerzální HPLC-UV/MS metodu pro stanovení různých GLP-1 peptidů (např. semaglutidu, liraglutidu, glukagonu) pomocí systematického protokolu. Metoda měla minimalizovat rizika spojená s interakcí peptidů s kov-oxidovými povrchy standardních HPLC systémů a zkrátit dobu vývoje.

Použitá metodika a instrumentace

Systematický protokol zahrnoval:

• Screening různých kolonek (XSelect Premier Peptide, XBridge Peptide, Peptide CSH C18) a elučních podmínek (TFA, kyselina mravenčí).
• Porovnání standardních nerezových částí s povlakem MaxPeak High Performance Surface (HPS).
• Detekci pomocí UV a QDa hmotnostního detektoru.

Hlavní výsledky a diskuse

Nasazením technologie MaxPeak HPS se podařilo:

• Eliminovat metal-oxido interakce, které vedly k adsorpci peptidů a variability vrcholků.
• Zvýšit výšku a plochu vrcholů o ~20 % u semaglutidu a ~40 % u liraglutidu ve srovnání s nerezem.
• Zlepšit meziinjekční reprodukovatelnost a limity detekce bez časově náročné pasivace.
• Potvrdit čistotu vrcholů spektroskopickou analýzou (purity angle < purity threshold).

Přínosy a praktické využití metody

Protokol umožňuje rychlý vývoj robustních metod pro kontrolu GLP-1 peptidů v QA/QC laboratořích. MaxPeak HPS kolony prodlužují životnost a zvyšují spolehlivost analýz bez nutnosti obvyklých pasivačních postupů.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se širší nasazení povlakových technologií v separacích citlivých biomolekul (oligonukleotidy, fosforylované peptidy). Integrace HPS povrchů s pokročilými detektory (MS/MS, ion mobility) otevírá prostor pro hlubší charakterizaci impurit a variant syntetických peptidů.

Závěr

Systematický přístup k vývoji separačních metod ve spojení s technologií MaxPeak HPS poskytuje rychlé, citlivé a reprodukovatelné řešení pro kvalitativní a kvantitativní kontrolu syntetických GLP-1 peptidů. Eliminace kov-oxidových interakcí zvyšuje efektivitu a spolehlivost analýz.

Použitá instrumentace

• Kapalinový chromatograf HPLC-UV/MS s QDa detektorem
• Kolony XSelect Premier Peptide CSH C18, XBridge Peptide BEH C18, Peptide CSH C18 (MaxPeak HPS vs. nerezové provedení)
• Eluční přísady: trifluoroctová kyselina (TFA), kyselina mravenčí