Ion chromatography determination of nitrate and nitrite in metformin API and tablets

Význam tématu

Monitorování nitritů a nitrátů v léčivých surovinách a tabletách je klíčové pro zajištění bezpečnosti farmaceutických produktů. Přítomnost těchto anorganických nečistot může vést k tvorbě nitrosaminů, považovaných za potenciálně karcinogenní látky. Iontová chromatografie s potlačenou vodivostní detekcí nabízí citlivou a selektivní metodu pro sledování těchto aniontů v metforminu HCl API i hotových tabletách.

Cíle a přehled studie

Cílem práce bylo vyvinout a validovat iontově chromatografickou metodu pro simultánní stanovení dusitanu a nitrátu v metforminu HCl API, tabletách a excipientech. Studii tvořilo optimalizování chromatografických podmínek, příprava vzorků, sestavení kalibračních křivek a ověření klíčových validačních parametrů, jako je linearita, citlivost, přesnost a recovery, včetně aplikace na reálné farmaceutické šarže.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky API, tablet i excipientů byly váženy, extrahovány v deionizované vodě, sonikovány, filtrovány přes nylonový filtr (0,2 µm) a pročištěny pomocí Thermo Scientific OnGuard II RP cartridge. Separace probíhala na IonPac AS19 kolonce s AG19 guard při gradientním nástřiku NaOH (100 mM) a deionizované vody. Potlačovač ADRS 600 v recyklačním režimu a vodivostní detektor zajišťovaly selektivní měření.

• Iontový chromatograf: Thermo Scientific Dionex ICS-6000 HPIC
• Kolonka: IonPac AS19 (4 x 250 mm, 4 µm) s guard AG19
• Eluent: gradient 5–50 % 100 mM NaOH / DI voda, průtok 1,0 mL/min
• Teplota kolony 40 °C, objem injekce 10 µL, doba běhu 40 min

Hlavní výsledky a diskuse

Kalibrační křivky pro nitrit i nitrát v rozsahu 0,1–25 mg/L vykázaly vynikající linearitu s koeficientem determinace R2 = 0,999. Detekční a kvantifikační limity byly stanovena na 0,025 mg/L a 0,1 mg/L. Průměrné recovery ve zkušebních úrovních LOQ, 50 %, 100 % a 150 % dosahovaly 90–115 %. V API a tabletách nebyl nitrit detekován v několika šaržích, zatímco koncentrace nitrátu se pohybovala mezi 14,7 až 25,5 mg/kg. V excipientech se naměřené hodnoty dusitanů a nitrátů pohybovaly do 15,6 mg/kg a 135 mg/kg. Metoda rovněž umožnila oddělení a stanovení dalších aniontů (fluorid, bromid, fosfát, síran).

Přínosy a praktické využití metody

Popisovaná metodika umožňuje v jedné analýze simultánní stanovení dusitanu i nitrátu s vysokou selektivitou a citlivostí. Je vhodná pro rutinní kontrolu kvality API, tablet a excipientů v laboratořích QA/QC, a minimalizuje riziko kontaminace nitrosaminy.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj může směřovat k integraci HPIC s hmotnostní spektrometrií pro zvýšení selektivity, automatizaci přípravy vzorků, miniaturizaci chromatografických systémů, použití ekologičtějších eluentů a rozšíření metody na sledování dalších toxických anorganických nečistot.

Závěr

Navržená a validovaná metoda iontové chromatografie s potlačenou vodivostní detekcí je robustní, citlivá a spolehlivá pro simultánní stanovení dusitanu a nitrátu v metforminu HCl API, tabletách a excipientech. Splňuje požadavky farmaceutické kontroly kvality a přispívá k řízení rizik spojených s tvorbou nitrosaminů.

Reference

• FDA Updates and Press Announcements on NDMA in Metformin. FDA, 2021.
• AN73987: Determination of Nitrite in Pharmaceuticals. Thermo Scientific, 2021.
• TN74093: Designing Ion Chromatography Methods for Determining Amines in Pharmaceuticals. Thermo Scientific, 2021.