Agilent Bravo Automated Liquid Handling Platform: 96-Channel 30 μL Tip Accuracy and Precision

Význam tématu

Automatizace manipulace s kapalinami je klíčová pro zajištění vysoké průchodnosti vzorků při zachování spolehlivosti výsledků. Přesné a přesné pipetování v mikroobjemech usnadňuje standardizaci laboratorních procesů, snižuje lidské chyby a umožňuje realizaci náročných genomických, bioanalytických a buněčných aplikací.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyhodnotit přesnost (accuracy) a opakovatelnost (precision) Agilent Bravo platformy vybavené 96kanálovou ST hlavicí a 30µL jednorázovými hroty při dispensech v nízkém objemovém rozsahu (0,5–5µL). Studie zahrnovala identifikaci případných odchylek, míry rozptylu a četnosti odlehlých hodnot.

Použitá metodika a instrumentace

Pro stanovení objemových charakteristik byla připravena roztok tartrazinu v DMSO (0,25 % hmot./obj.). Postup:

• Deck Bravo: pozice pro ruční rezervoár s roztokem, pozice pro krabičku s 30µL hroty, pozice pro mikrodestičku.
• Software Agilent VWorks: definice tříd kapalných metod pro dispense 0,5–1µL a 1–5µL.
• Dispense požadovaných objemů (0,5, 1,0, 5,0µL) do čtvrtin 384destičky, následné doplnění na 50µL vodou a centrifugace 1 800 rpm/60 s.
• Detekce absorbance při 405 nm pomocí UV/Vis spektrofotometru pro mikrodestičky.

Hlavní výsledky a diskuse

Naměřené hodnoty přesnosti a opakovatelnosti:

• 0,5 µL: CV 2,9 %, odchylka ±4,8 %
• 1,0 µL: CV 1,9 %, odchylka ±2,0 %
• 5,0 µL: CV 0,9 %, odchylka ±1,1 %

Frekvence odlehlých hodnot větších než 5 % byla nejvyšší při 0,5 µL (18 %), u 1 µL činila 4 % a u 5 µL žádné. Časy přenosu byly 22 s/plate pro 0,5 a 1 µL dispense, pro 5 µL pak 37 s. Výsledky splňují i přísnější limity ±10 % a CV ≤ 5 % v celém rozsahu.

Přínosy a praktické využití metody

Validace Bravo platformy potvrzuje její schopnost opakovaně a přesně pipetovat mikroobjemy, což je zásadní pro vysokoproduktové screeny, přípravu vzorků pro hmotnostní spektrometrii, vysoce přesná kvantitativní stanovení i buněčné kultivace a testy.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj bude směřovat k integraci s robotickými systémy pro plnou automatizaci end-to-end workflow, miniaturizaci objemů pod 0,5 µL, adaptaci pro nové typy detekcí (fluorescenční, luminescenční) a využití strojového učení pro optimalizaci parametrů dispense.

Závěr

Agilent Bravo s 96kanálovou ST hlavicí a 30µL hroty prokazuje vynikající výkon v nízkých objemech, s CV pod 3 % a odchylkami pod 5 %. Platforma umožňuje efektivní, spolehlivou a flexibilní manipulaci s kapalinami, vhodnou pro široké spektrum laboratorních aplikací.

Reference

1. Holman JW, Mifflin TE, Felder RA, Demers LM. Evaluation of an automated preanalytical robotic workstation at two academic health centers. Clin Chem. 2002 Mar;48(3):540–8.