Agilent Bravo Automated Liquid Handling Platform: 96-Channel 10 μL Tip Accuracy and Precision

Význam tématu

Automatizované liquid handling platformy umožňují zpracovat velké objemy vzorků s vysokou reprodukovatelností a minimalizací lidské chyby. Přesné a precizní pipetování v nižších objemových rozmezích je klíčové pro biochemické, genomické či farmaceutické aplikace, kde i malá odchylka může výrazně ovlivnit výsledky.

Cíle a přehled studie

Cílem této technické analýzy bylo stanovit přesnost a preciznost Agilent Bravo Automated Liquid Handling Platform vybavené 96kanálovou ST hlavou a 10 µL špičkami v dolním rozmezí praktických objemů (0,3–2,0 µL). Studie porovnala požadované a skutečně dávkované objemy a vyhodnotila výskyt odlehlých hodnot.

Použitá metodika

• Příprava 0,25% (hmotn./obj.) roztoku tartrazinu v DMSO a jeho nalití do manuálního plnicího zásobníku.
• Aspirace 0,3, 0,5 a 2,0 µL roztoku z zásobníku s preaspirací (0,4 µL pro menší objemy, 1 µL pro 2 µL) a blowoutem (0,4 µL nebo 1 µL).
• Dispense do jednotlivých kvadrantů 384jamkových destiček, následné ředění vodou na konečný objem 50 µL a centrifugace (1800 ot./min, 60 s).
• Měření absorbance při 405 nm pro stanovení skutečně dávkovaných objemů pomocí kalibrační křivky (0,1–2,5 µL).
• Výpočet koeficientu variance (CV) a procentuální přesnosti na základě průměru tří opakování.

Použitá instrumentace

• Agilent Bravo Automated Liquid Handling Platform s devíti pozicemi na decku a vyměnitelnou 96kanálovou ST hlavou
• Jednorázové špičky Agilent 384ST 10 µL (katal. č. 10734-202)
• Manuální zásobník Agilent 96-well (katal. č. 08105-001)
• 384jamkové polystyrenové flat-bottom destičky (Greiner 781101)
• UV/Vis spektrofotometr s filtrem 405 nm

Hlavní výsledky a diskuse

• Pro 0,3 µL dosáhla platforma CV 3,1 % a přesnosti ±1,5 % (7 % odlehlých hodnot nad 5 %).
• Pro 0,5 µL byla CV 2,3 % a přesnost ±0,8 % (3 % odlehlých hodnot nad 5 %).
• Při 2,0 µL činila CV 1,1 % a přesnost ±0,8 % (žádné odlehlé hodnoty nad 5 %).
• Objemy nad 2 µL vykazují stejnou nebo vyšší přesnost a preciznost než 2 µL.
• Průměrná doba dávkování na jednu 96jamkovou destičku se pohybovala mezi 24 a 27 sekundy.

Přínosy a praktické využití metody

Agilent Bravo s 96kanálovou ST hlavou a 10 µL špičkami nabízí vysokou reprodukovatelnost pipetování v nízkých objemech, což je klíčové pro testovací sady s malými reakcemi, přípravu knihoven pro sekvenování nebo vysokopropustné screeningové aplikace. Díky konfigurabilnímu decku lze platformu přizpůsobit termicky řízeným, chladicím či míchacím stanicím.

Budoucí trendy a možnosti využití

S dalším vývojem softwarových protokolů a optimalizací liquid classes lze očekávat posun hranice přesnosti pod 0,3 µL. Integrace Bravo do komplexních robotických linek a kombinace s AI řízenou kontrolou kvality otevře cestu k plně autonomním laboratořím s minimalizovaným lidským zásahem.

Závěr

Testování potvrdilo, že Agilent Bravo v kombinaci s 96kanálovou ST hlavou splňuje nebo překračuje požadavky na přesnost (±10 %) a preciznost (CV ≤5 %) v rozsahu 0,3–10 µL. Díky vysoké rychlosti a modularitě představuje spolehlivé řešení pro široké spektrum aplikací v analytické chemii a biotechnologiích.

Reference

1. Holman JW, Mifflin TE, Felder RA, Demers LM Evaluation of an automated preanalytical robotic workstation at two academic health centers Clin Chem 2002 Mar 48(3):540-8