Development and Verification of a Generic Agilent 1260 Infinity II Binary HPLC Method

Význam tématu

Rychlá a univerzální metoda RP-HPLC pro simultánní analýzu sedmi běžných OTC složek nachází široké uplatnění v laboratořích pro kontrolu kvality chladících a protikýchacích přípravků. Zkrácení doby analýzy a snížení spotřeby mobilní fáze přispívají k efektivnímu provozu a nižším nákladům.

Cíle a přehled studie / článku

Primárním cílem bylo vyvinout a verifikovat jednoduchý a rychlý binární gradientní RP-HPLC postup na systému Agilent 1260 Infinity II pro současné stanovení acetaminofenu, dextromethorfanu, doxylaminu, fenylefrinu, guaifenezinu, kofeinu a kyseliny acetylsalicylové. Metoda měla dosáhnout doby běhu přibližně pět minut a vyhovět parametrům ICH Q2 (R1).

Použitá metodika a instrumentace

Metoda byla realizována na přístroji Agilent 1260 Infinity II se softwarem OpenLab CDS. Jako kolona byla použita InfinityLab Poroshell 120 EC-C8, rozměr 2.1 × 150 mm, částice 2.7 µm. Mobilní fáze A představovala 0.1 % TFA ve vodě, mobilní fáze B byla směsí acetonitrilu a methanolu v poměru 75:25 v objemu s 0.1 % TFA. Gradientní program začínal na 15 % fáze B a během pěti minut se lineárně zvýšil na 100 % fáze B. Provozní podmínky: teplota kolony 30 °C, průtok 0.35 mL·min-1, objem vstřiku 5 µL, detekce při 280 nm na diodovém array detektoru.

• Agilent 1260 Infinity II Binary Pump
• Agilent 1260 Infinity II Vial Sampler
• Agilent 1260 Infinity II Multicolumn Thermostat
• Agilent 1260 Infinity II Diode Array Detector
• Software Agilent OpenLab CDS

Hlavní výsledky a diskuse

Z optimalizačních experimentů vyplynulo, že kombinace acetonitrilu a methanolu v poměru 75:25 v mobilní fázi B poskytuje nejlepší rozlišení za pětiminutové doby běhu. Ověření metody prokázalo specifickost bez interferencí, lineárnost v rozsahu 30 až 140 % nominální koncentrace s korelačním koeficientem > 0.999, přesnost s %RSD < 2 % a robustnost proti změnám průtoku i teploty.

Přínosy a praktické využití metody

Díky pětiminutové době analýzy a minimální spotřebě mobilní fáze se metoda hodí pro rutinní kontrolu kvality OTC přípravků. Univerzálnost postupu dovoluje zpracovat různorodé matrice a snadno integrovat do provozu QC laboratoří.

Budoucí trendy a možnosti využití

V budoucnu lze metodu dále zrychlit využitím menších částic a vyššího tlaku, případně ji rozšířit o další analytické složky nebo adaptovat pro detekci hmotnostní spektrometrií. Integrace s automatizovanými vzorkovači a on-line monitoringem přispěje k dalšímu zefektivnění analytického procesu.

Závěr

Vyvinutý generický HPLC postup na Agilent 1260 Infinity II vykazuje vynikající výkonnost pro simultánní stanovení sedmi aktivních složek v OTC produktech. Metoda je rychlá, spolehlivá a splňuje požadavky pro rutinní analýzu ve farmaceutické praxi.

Reference

1. Dongala T, Katari NK, Palakurthi AK, Jonnalagadda SB. Development and Validation of a Generic RP-HPLC PDA Method for the Simultaneous Separation and Quantification of Active Ingredients in Cold and Cough Medicines. Biomed Chromatogr. 2019;33(11):e4641.
2. Burge LJ, Raches DW. A Rapid HPLC Assay for the Determination of Dextro-propoxyphene Related Substances in Combination with Aspirin, Acetaminophen, and Caffeine in Tablet and Capsule Formulations. J Liq Chromatogr Relat Technol. 2003;26:1977-1990.
3. Dong Y, Chen X, Chen Y, Chen X, Hu Z. Separation and Determination of Pseudoephedrine, Dextromethorphan, Diphenhydramine and Chlorpheniramine in Cold Medicines by Nonaqueous Capillary Electrophoresis. J Pharm Biomed Anal. 2005;39:285-289.
4. Heydari R. A New HPLC Method for the Simultaneous Determination of Acetaminophen, Phenylephrine, Dextromethorphan and Chlorpheniramine in Pharmaceutical Formulations. Anal Lett. 2008;41:965-976.