Fully automated platform for determination of Tricyclic Antidepressant in serum

Význam tématu

Tricyklická antidepresiva (TCA) jsou klíčovými léky při léčbě depresí, úzkostí a bolesti. Díky úzkému terapeutickému oknu a riziku závažných nežádoucích účinků je nezbytné sledovat jejich koncentrace v séru vysoce přesnými a spolehlivými analytickými metodami. Plně automatizovaná LC–MS/MS platforma přináší standardizaci a vysokou vzorkovou propustnost vhodnou pro rutinní analýzu.

Cíle a přehled studie

Studie si klade za cíl demonstrovat fungování plně automatizované přípravy vzorků a kvantifikace více než 13 TCA v lidském séru bez manuální intervence. Validace zahrnuje posouzení linearity, přesnosti, preciznosti a propustnosti metody.

Použitá metodika

• Příprava vzorku: automatizované vysrážení proteinů, precipitace a filtrace pomocí CLAM-2000.
• Reagencie: ClinMass® TDM Kit (Recipe Chemicals) pro kalibrátory, interní standardy a kontrolní vzorky.
• Chromatografie: HPLC Nexera X2 s analytickým sloupcem Recipe MS9030 (40 °C), gradientní eluce 3,8 min, průtok 0,6 ml/min.
• Detekce: LCMS-8060, ionizace ESI+, režim MRM s optimalizovanými přechody pro každé TCA.

Použitá instrumentace

• CLAM-2000 (Shimadzu) pro plně automatizovanou přípravu vzorků.
• Nexera X2 HPLC (Shimadzu) spojené s LCMS-8060 (Shimadzu) pro analytické oddělení a detekci.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda prokázala vynikající linearitu (R2 ≥ 0,999) napříč testovaným rozsahem koncentrací. LLOQ dosáhl dostatečné citlivosti pro klinické aplikace. Intraday i interday variace (CV) a bias zůstaly v rámci akceptovaných limitů (±15 %). Díky paralelně probíhající přípravě a analýze lze získat jeden výsledek každých 5 minut.

Přínosy a praktické využití metody

• Eliminace manuálních kroků a snížení variability operátora.
• Zvýšení reprodukovatelnosti a spolehlivosti výsledků v rutinních laboratořích.
• Snížení spotřeby reagencií a nižší náklady na analýzu.
• Vhodné pro terapeutický monitoring, klinickou toxikologii a farmaceutický výzkum.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Začlenění dalších psychoaktivních látek a metabolitů do panelu analýzy.
• Integrace s laboratorními informačními systémy (LIMS) pro automatizované řízení dat.
• Vývoj miniaturizovaných modulů pro bod péče a mobilní laboratoře.
• Pokročilá datová analýza a chemometrie pro predikci farmakokinetiky.

Závěr

Plně automatizovaná platforma pro kvantifikaci tricyklických antidepresiv v séru nabízí vysokou propustnost, vynikající přesnost a preciznost bez nutnosti manuální přípravy vzorků. Metoda je perspektivní pro rutinní terapeutický monitoring, klinickou toxikologii a farmaceutický výzkum.