LC/MS/MS Method Package for Sugars and Sugar Nucleotides

Význam tématu

Analýza monosacharidů, disacharidů a aktivovaných forem cukrů (nukleotidových cukrů) je klíčová pro potravinářský průmysl, biotechnologie a studium metabolismu. Konkrétní detekce a kvantifikace těchto látek umožňuje sledovat glykanové syntézy, metabolické dráhy i kvalitu biokultur.

Cíle a přehled studie / článku

Popisuje se komplexní metoda pro LC–MS/MS analýzu 25 různých cukrů, aminocukrů, cukerných kyselin a alkoholů a 9 nukleotidových cukrů. Součástí je předúprava vzorků (buněčné kultury, supernatanty, intracelulární extrakty) a optimalizované analytické podmínky.

Použitá metodika a instrumentace

Analyty jsou separovány pomocí kapalinové chromatografie s kolonkami doporučenými pro rozlišení stereoizomerů. Detekce probíhá na LC–MS/MS systému Shimadzu LCMS-8060NX řízeném softwarem LabSolutions LCMS (ver. 5.120 nebo vyšší). Metoda využívá multiple reaction monitoring (MRM) s nastavením optimálních parametrů pro každý registrovaný analyzovaný typ.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda prokázala schopnost oddělit a kvantifikovat isomerní cukry i nukleotidové cukry ve standardních směsích s vysokou citlivostí a selektivitou. Ukázalo se, že doporučené sloupce a gradientní programy minimalizují čas analýzy bez ztráty rozlišení.

Přínosy a praktické využití metody

Ultrarychlá a robustní kvantifikace sacharidů a jejich aktivovaných forem šetří čas i zdroje při sledování metabolických studií, kvality potravinových přísad a kontroly glykoformací ve výzkumu.

Budoucí trendy a možnosti využití

Integrace s multi-omics balíčky umožňuje vizualizaci kvantitativních změn v metabolických mapách. Další vývoj směřuje k automatizaci přípravy vzorků a rozšíření na další deriváty sacharidů pro klinický výzkum a diagnostiku.

Závěr

Představená LC–MS/MS metoda nabízí vysoce výkonnou analýzu cukrů a nukleotidových cukrů s minimální předúpravou. Vysoká kvalita separace isomerů a kompatibilita s multi-omics nástroji zvyšují její uplatnění v biochemii i průmyslu.

Reference

1. Shimadzu Corporation. LC/MS/MS Method Package for Sugars and Sugar Nucleotides. First Edition November 2023.