Selective and Sensitive Method for Estimation of Liraglutide in Human Plasma using Shimadzu LCMS-8060

Význam tématu

Liraglutid je dlouhodobě působící agonista receptoru GLP-1 využívaný k léčbě diabetu 2. typu a obezity. Pro farmakokinetické a klinické studie je nezbytné přesné a selektivní stanovení jeho koncentrace v biologických vzorcích. Metoda s vysokou citlivostí a nízkou spotřebou vzorku šetří náklady i biologický materiál a zefektivňuje provoz analytických laboratoří.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem bylo vyvinout a validovat rychlou, vysoce průchodnou LC-MS/MS metodu pro kvantifikaci liraglutidu v lidské plazmě s dolní mezí kvantifikace (LLOQ) 0,5 ng/mL. Metoda má být snadno přenositelná do rutiních laboratoří se zaměřením na jednoduchou přípravu vzorku a minimální objem plazmy.

Použitá metodika a instrumentace

• Extrakce: pozitivně tlakově podporovaná SPE z 200 μL plazmy; eluční směs metanol–acetonitril.
• Chromatografie: Shim-pack Velox Biphenyl (2,1×100 mm, 2,7 μm); mobilní fáze A – 0,1 % kyseliny mravenčí ve vodě, B – 0,1 % kyseliny mravenčí v acetonitrilu; průtok 0,25 mL/min; teplota 40 °C; doba analýzy 10 min; objem injekce 25 μL.
• Detekce: Shimadzu LCMS-8060 s rozhraním ESI v pozitivním módu; MRM přechod m/z 938,5→1128,4; optimalizované podmínky teplot a tlaků plynů pro maximální ionizaci.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda prokázala lineární rozsah 0,5–202,7 ng/mL (r2>0,99). Intra- a interdenní přesnost a správnost vyhověly kritériím (LLOQ: 80–120 % správnost, ≤20 % CV; QC úrovně: 85–115 % správnost, ≤15 % CV). Průměrná návratnost činila 50,9 %, matriční faktor ~0,96, bez významného zbytkového carry-over.

Přínosy a praktické využití metody

• Nízká LLOQ 0,5 ng/mL umožňuje sledování nízkých koncentrací v PK studiích.
• Malý objem plazmy (200 μL) šetří vzorky a prodlužuje životnost MS.
• Jednostupňová SPE extrakce zrychluje přípravu a zvyšuje kapacitu laboratorních procesů.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další automatizace přípravy vzorků, nasazení mikro- a nano-LC pro nižší spotřebu rozpouštědel a integrace vysoce rozlišovacích MS systémů. Metodu lze rozšířit na další biologicky aktivní peptidy i do klinické praxe.

Závěr

Vyvinutá SPE-LC-MS/MS metoda na platformě Shimadzu LCMS-8060 je robustní, citlivá a vysoce průchodná. Splňuje mezinárodní validační požadavky a je připravena pro rutinní farmakokinetické analýzy liraglutidu v lidské plazmě.

Reference

• Wikipedia Liraglutide, 2020
• RxList Victoza, 2020