Simple, Sensitive and Rapid Quantification of Teriparatide in Human Plasma by LCMS-8060

Význam tématu

Teriparatid je rekombinantní paratyroidní hormon využívaný v léčbě osteoporózy, který vyžaduje extrémně citlivou analytickou metodu díky nízkým hladinám v plazmě a rychlé eliminaci.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo vyvinout a validovat rychlou, jednoduchou a vysoce citlivou kvantitativní metodu stanovení teriparatidu v lidské plazmě za použití systému Shimadzu LCMS-8060 a Nexera X2 UHPLC.
Studie zahrnuje optimalizaci metodiky extrakce, chromatografie a hmotnostní spektrometrie, a ověření parametrů selektivity, linearity, přesnosti, mezidení přesnosti a zotavení.

Použitá metodika a instrumentace

• Extrahování analyzované látky probíhalo pomocí jednorázového SPE (Solid-Phase Extraction) s podmíněním, promytím a elučním krokem, následným odpařením eluátu a reekstrakcí v mobilní fázi.
• Chromatografie byla provedena na kolonce Shim-pack Velox C18 (100 × 2,1 mm, 2,7 µm) s mobilními fázemi 0,1 % kyseliny mravenčí ve vodě a acetonitrilem, gradientem 22–25 % organiky a průtokem 0,3 mL/min při 40 °C.
• Hmotnostní spektrometrie v režimu MRM v pozitivním módu na LCMS-8060 s elektronebulizací (ESI), zahřátým zdrojem, UF-Qarray ion guide technologií a MRM přechody 687,25→787,45 m/z.

Hlavní výsledky a diskuse

• Dolní mezní koncentrace (LLOQ) 5 pg/mL, lineární rozsah 5–300 pg/mL s koeficientem determinace > 0,98.
• Intradení a mezidení přesnost a správnost pro LLOQ, LQC, MQC a HQC splňují kritéria (přesnost < 15 % RSD, správnost 93–112 %).
• Průměrné zotavení analytoitu 80,4 % (RSD 7,7 %), střední faktor matrice 1,03 (RSD < 9 %), žádný významný carry-over.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí připravené, validované řešení pro farmakokinetické studie teriparatidu v klinických a výzkumných laboratořích. Jednoduché SPE a rychlý LC-MS/MS běh podporují vysokou průchodnost vzorků a opakovatelnost výsledků.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Integrace automatizovaných systémů SPE pro zvýšení throughput a snížení variability.
• Využití mikrofluidních platforem pro zmenšení objemů a další snížení LLOQ.
• Rozšíření na vícekanálové hmotnostní spektrometry a vysokorozlišovací analýzy pro komplexní bioanalytiku.

Závěr

Vyvinutá metoda na platformě LCMS-8060/Nexera X2 splňuje náročné požadavky na citlivost, selektivitu a reprodukovatelnost v bioanalytickém stanovení teriparatidu, což ji činí vhodnou pro preklinické a klinické studie.

Použitá instrumentace

• Shimadzu LCMS-8060 Triple Quadrupole Mass Spectrometer
• Nexera X2 UHPLC
• Shim-pack Velox C18 kolona 100×2,1 mm, 2,7 µm

Reference

1. DrugBank. Teriparatide (DB06285). Přístup 08.03.2022.
2. RxList. Forteo. Přístup 08.03.2022.