Optimized reproducibility using a state of the art UHPLC system for the analysis of catechins found in tea

Význam tématu

Katechiny v čaji představují řadu bioaktivních sloučenin s významnými antioxidačními vlastnostmi. Přesná analýza těchto látek je zásadní pro kontrolu kvality potravin, výzkum zdravotních účinků a dodržení norem v průmyslové praxi. Spolehlivá reprodukovatelnost metod zajišťuje důvěru v chromatografická data při přenosu mezi laboratořemi a přístroji.

Cíle a přehled studie / článku

Hlavním cílem bylo demonstrovat přenos chromatografické metody pro separaci sedmi katechinů ze systému Thermo Scientific UltiMate 3000 RSUHPLC na systém Vanquish Flex UHPLC bez úprav parametrů metody. Současně studie ověřuje vhodnost kolony Thermo Scientific Acclaim RSLC 120 C18 pro analýzu běžně se vyskytujících katechinů.

Použitá metodika a instrumentace

Pro separaci sedmi katechinů (gallocatechin, epigallocatechin, catechin, epicatechin, epigallocatechin gallate, gallocatechin gallate a epicatechin gallate) byla použita gradientní UHPLC metoda s mobilními fázemi obsahujícími 0,1 % TFA ve vodě a acetonitrilu. Pracovní teplota kolony 25 °C, tok 0,45 mL/min a detekce UV při 280 nm.

Použitá instrumentace

• UltiMate 3000 RSUHPLC: LPG-3400RS pumpa, WPS-3000RS autosampler, TCC-3000RS kolonnová pec, DAD-3000RS detektor, analytická flow buňka 13 µl
• Vanquish Flex UHPLC: Quaternary Pump F, základna systému, Split Sampler FT, Column Compartment H, Active Pre-heater, Diode Array Detector HL, LightPipe 10 mm flow buňka
• Software: Chromeleon 7.2 SR4, Virtuoso Vial Identification System
• Kolona a mobilní fáze: Acclaim RSLC 120 C18 (2,2 µm, 150×2,1 mm), LC/MS grade voda, HPLC grade acetonitril, TFA

Hlavní výsledky a diskuse

Separační metoda dosáhla úplného rozlišení všech sedmi katechinů během 13 min na obou systémech bez úprav gradientu. Komparativní měření %RSD pro retenční časy, šířky vrcholů ve výšce poloviny a plošné integrály ukázalo zlepšení reprodukovatelnosti o více než 50 % u systému Vanquish Flex ve srovnání s UltiMate 3000 RSUHPLC. Technologie SmartInject minimalizovala tlakové špičky při vstřikování a přispěla k prodloužení životnosti kolony.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje rychlý a spolehlivý přenos chromatografických postupů mezi UHPLC systémy bez nutnosti revalidace. Zajišťuje vysokou přesnost kvantifikace katechinů, což je klíčové pro QA/QC v potravinářství, farmaceutickém výzkumu a environmentální analýze.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další vývoj nízkodisperzních pump a autosamplerů pro zvýšení rychlosti a citlivosti separací. Integrace se spektrometrickými detektory rozšíří aplikace na širší škálu bioaktivních sloučenin. Významná bude automatizace vzorkování a vzdálené monitorování analytických procesů.

Závěr

Studie potvrdila schopnost přenosu UHPLC metody pro stanovení katechinů bez úprav parametrů a prokázala výrazné zlepšení reprodukovatelnosti u systému Vanquish Flex. Acclaim RSLC 120 C18 kolona se osvědčila pro rychlé a efektivní separace katechinů v komplexních matricích.

Reference

V původním textu nebyly uvedeny specifické literární zdroje.