The High-Resolution Reversed-Phase HPLC Separation of Licorice Root Extracts Using Long Rapid Resolution HT 1.8-μm Columns

Význam tématu

Analýza extraktů z lékořice je důležitá pro potravinářský a farmaceutický průmysl i tradiční medicínu. Glycyrrhizin a jeho aglykon glycyrrhetinová kyselina vykazují sladivost, léčivé účinky a antivirovou aktivitu, což vyžaduje spolehlivé metody oddělení a stanovení.

Cíle studie

Porovnat konvenční zpětně fázovanou HPLC kolonu s 5 µm částicemi a krátkou vysokorychlostní RRHT kolonu s 1,8 µm částicemi při separaci glycyrrhizinu a glycyrrhetinové kyseliny a složitých licorice extraktů.

Použitá instrumentace

• Agilent 1200 Series Rapid Resolution System
• Detektor vícevlnný (MWD) při 254 nm se 450 nm referencí
• ZORBAX SB-C18 kolony: 4,6×250 mm, 5 µm a 4,6×150 mm, 1,8 µm

Použitá metodika

Mobilní fáze A byla voda s 1 % octovou kyselinou, fáze B acetonitril s 1 % octovou kyselinou. Gradient konvenční kolony probíhal z 5 na 100 % B za 50 minut při průtoku 1,0 ml/min, u RRHT kolony za 30 minut. Vzorky extraktů A a B byly filtrované, objem injekce 5 µl.

Hlavní výsledky a diskuse

RRHT kolona dosáhla podobné selektivity jako konvenční, ale zkrátila dobu analýzy o přibližně 40 % (z ~50 na ~30 minut). Výpočet kapacity špiček ukázal nárůst z 290 na 442 pro extrakt A a z 306 na 426 pro extrakt B. Glycyrrhetinová kyselina tvořila ~0,5 % glycyrrhizinu v extraktu A a ~1 % v extraktu B.

Přínosy a praktické využití

Snížení času analýzy při zachování vysokého rozlišení umožňuje rychlejší a citlivější sledování aktivních složek v komplexních přírodních extraktech a biotechnologických samplich.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření krátkých RRHT sloupců pro analýzu dalších přírodních produktů a komplexních směsí, integrace s hmotnostní spektrometrií a automatizované vysokopropustné stanovení kvality.

Závěr

Krátké RRHT kolony s 1,8 µm částicemi významně zvyšují kapacitu špiček a průchodnost analýz licorice extraktů ve srovnání s tradičními 5 µm kolony a představují efektivní nástroj pro moderní analytickou chemii.

Reference

1. S Fanali, Z Aturki, G D’Orazio, M A Raggi, M G Quaglia, C Sabbioni, A Rocco J Sep Sci 28 982–986 2005
2. I Kitagawa Pure Appl Chem 74(7) 1189–1198 2002