Analysis of Citrate and Chlorogenic acid in Processed Mume Fructus

Význam tématu

Citráty a kyselina chlorogenová patří mezi klíčové bioaktivní složky Mume Fructus, ovlivňující jeho farmakologické vlastnosti. Kontrola jejich obsahu je nezbytná pro zajištění kvality, bezpečnosti a účinnosti tradičních čínských bylinných přípravků.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo vyvinout robustní reverzní fázovou HPLC metodu pro simultánní stanovení citrátu a kyseliny chlorogenové v surovém i zpracovaném materiálu Mume Fructus. Studie porovnala chromatogramy standardních roztoků se vzorky byliny připravenými dvěma různými postupy extrakce.

Použitá metodika a instrumentace

• Příprava standardů: Citrát a kyselina chlorogenová v koncentraci 1 mg/mL ve vodě.
• Extraktivní postup pro zpracovaný materiál: 1 g sušeného Mume Fructus refluxováno ve 50 mL vody po dobu 30 minut, poté ochlazeno, protřepáno a přefiltrováno.
• Postup pro práškový vzorek: 0,4 g komerčního prášku rozpuštěno ve vodě a doplněno do 50 mL, pečlivě promícháno a filtrováno.

Použitá instrumentace

• Kapalinový chromatograf LC-40B X3
• Kolona Shim-pack GIS C18 (150 mm × 2,1 mm, částice 2 μm)
• Mobilní fáze A: 0,5 % dihydrogenfosforečnan amonný s kyselinou fosforečnou (pH 2,91); B: acetonitril
• Gradient: 1 % B (0,0 min) → 2 % (3,0 min) → 8 % (9,0–30,0 min) → 10 % (40,0 min) → 1 % (41,0–46,0 min)
• Průtok 0,2 mL/min, teplota kolony 30 °C, objem injekce 1 μL, detekce UV při 210 nm

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda zajistila spolehlivé rozlišení a kvantifikaci citrátu a kyseliny chlorogenové s opakovatelnými retenčními časy ve standardech i vzorcích. Srovnání chromatogramů potvrdilo konzistentní obsah obou analyzovaných složek v surovém i zpracovaném materiálu. Validace prokázala vysokou přesnost, liniaritu a opakovatelnost stanovení.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá a přesná kvantifikace klíčových složek tradičního bylinného materiálu.
• Uplatnění v rutinní kontrole kvality (QA/QC) a standardizaci farmaceutických surovin.
• Podpora výrobců a výzkumných laboratoří při ověřování homogenity a stability přírodních extraktů.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Propojení s hmotnostní spektrometrií ke zvýšení selektivity a citlivosti analýzy.
• Optimalizace metodiky směrem k ekologičtějším rozpouštědlům a zkrácení doby analýzy.
• Rozšíření aplikace na simultánní stanovení dalších biologicky aktivních sloučenin v bylinných matricích.

Závěr

Použitá RP-HPLC metoda s kolonu Shim-pack GIS C18 pro simultánní stanovení citrátu a kyseliny chlorogenové prokázala vysokou spolehlivost, přesnost a opakovatelnost. Metoda je vhodná pro rutinní kontrolu kvality a standardizaci Mume Fructus v tradiční m medicíně.

Reference

• Shimadzu Corporation: ERAS-1000-0021, Shim-pack GIS C18 – Analysis of Citrate and Chlorogenic acid in Processed Mume Fructus. First Edition, March 2023.