Method Development and Validation for the Determination of Pyrrolizidine Alkaloids in a Range of Plant-Based Foods and Honey Using LC-MS/MS (RAFA)

Význam tématu

Pyrrolizidinové alkaloidy jsou sekundární rostlinné metabolity s genotoxickými a karcinogenními účinky, které se mohou vyskytovat v potravinách a včelích produktech. Evropské nařízení stanovuje maximální limity obsahu těchto látek v čajích, koření, bylinkách a medu, což vyžaduje citlivé a přesné analytické metody pro jejich kontrolu.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo vyvinout a ověřit zjednodušenou UHPLC-MS/MS metodu pro kvantifikaci 35 pyrrolizidinových alkaloidů regulovaných v rámci EU v různých rostlinných potravinách a medu. Klíčovým aspektem bylo dosažení separace izomerů a zajištění dostatečné citlivosti pod hranicemi stanovených limitů.

Použitá metodika a instrumentace

Pro vzorky (čaje, koření, oregano, semena kmínu, med) byla použita extrakce následovaná čistěním pomocí Oasis MCX SPE kartridže na bázi kationtové výměny. Chromatografická separace probíhala na UHPLC systému Waters s optimalizovanými podmínkami elučního gradientu. Detekce byla prováděna tandemovou hmotnostní spektrometrií MS/MS v režimu MRM doplněném o plnoskenové akvizice režimu RADAR.

Hlavní výsledky a diskuse

Průměrné procento zpětných výtěžků se pohybovalo mezi 77 a 103 % podle typu vzorku, při relativní standardní odchylce pod 10 %. LOD a LOQ byly výrazně pod maximálními limity EU. Pro 27 z 35 sledovaných alkaloidů byla dosažena bazální separace, u čtyř párů izomerů byly výsledky stanoveny součtem koelutujících látek. Aplikace SPE významně snížila množství matricových interferencí a kontaminaci analytického systému.

Přínosy a praktické využití metody

Navržená metoda umožňuje spolehlivý screening a kvantifikaci pyrrolizidinových alkaloidů v potravinářských a včelích produktech, splňuje požadavky regulačních orgánů a je vhodná pro rutinní kontrolu kvality, včetně potravin určených pro kojence a malé děti.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření metodiky na další potravinářské matice, integrace s automatizovanými platformami pro přípravu vzorků, využití vysokorozlišovací hmotnostní spektrometrie a zavádění zelenějších extrakčních protokolů a miniaturizovaných SPE postupů.

Závěr

Vyvinutá UHPLC-MS/MS metoda je robustní, citlivá a validovaná pro 35 pyrrolizidinových alkaloidů v šesti typech vzorků. Splňuje požadavky EU a poskytuje spolehlivý nástroj pro monitorování bezpečnosti potravin.

Reference

• Dreolin N., Foddy H., Adams S., Hird S., Hancock P. Method development and validation for the determination of pyrrolizidine alkaloids in a range of plant-based foods and honey using LC-MS/MS. Waters Corporation, 2022.