Separation of 16 Cannabinoids Using the Agilent 1260 Infinity II LC System

Separace 16 kanabinoidů pomocí Agilent 1260 Infinity II LC systému

Význam tématu

Rychlá a spolehlivá analýza kanabinoidů je klíčová pro kontrolu kvality v konopném průmyslu
Rozvoj výrobků na bázi konopí zvyšuje potřebu stanovení kompletního profilu 16 významných látek
Právní požadavky, precizní měření a optimalizace výrobních procesů vyžadují vysoce výkonné metody

Cíle a přehled studie / článku

Popisuje se metoda pro chromatografické rozlišení a kvantifikaci 16 kanabinoidů během 12 minut
Metoda využívá Agilent 1260 Infinity II LC systém s gradientní elucí a detekcí v UV oboru
Cílem je dosáhnout základního rozlišení všech analyzovaných látek a vhodnosti pro rutinní použití

Použitá metodika a instrumentace

Sample preparation: extrakce sušeného listu nebo koncentrátu pomocí methanolu/ethanolu
5 stupňů ředění a filtrace přes RC 0,45 µm stříkačkové filtry
Chromatografie:

• Kolona Poroshell 120 EC-C18, 3,0×150 mm, 2,7 µm s ochranou kolonkou
• Mobilní fáze A: 5 mM ammonium formiát, 0,1 % kyseliny formiové ve vodě
• Mobilní fáze B: 0,1 % kyseliny formiové v acetonitrilu
• Gradient 75→90 % B v průběhu 11 minut, průtok 0,8 mL/min, teplota 30 °C, objem injekce 5 µL
• Detekce DAD při 230 nm, systém Agilent OpenLab CDS

Použitá instrumentace

• Agilent 1260 Infinity II binary pump a vialsampler
• Multicolumn thermostat a diode array detector HS
• OpenLab CDS Workstation software verze 2.7

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosahuje základního rozlišení (Rs >1,5) všech 16 kanabinoidů pod 12 minut
Linearity: koeficient R2 ≥0,999 pro všechny složky napříč třemi dny měření
Accuracy: většinou v rozmezí 95–105 % při koncentracích ≥1 µg/mL
Precision: RSD obvykle pod 2 % při vyšších koncentracích, mírně vyšší variabilita při LOQ úrovních
LOD/LOQ: v rozmezí 0,02–0,14 µg/mL (LOD) a 0,07–0,43 µg/mL (LOQ)
Metoda umožňuje potenciální rozšíření na více sloučenin díky reziduálnímu chromatografickému prostoru

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlý a robustní protokol pro testovací laboratoře, pěstitele i výrobce
• Splňuje regulační nároky na přesnost a opakovatelnost
• Možnost integrace do rutinních QA/QC postupů a automatizace reportingu

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření metodiky na analýzu více než 16 kanabinoidů
• Integrace hmotnostní spektrometrie pro zvýšení specificity
• Využití UHPLC pro další zkrácení doby analýzy
• Automatizované dávkovací a přípravné systémy pro vyšší throughput
• Vývoj zelených rozpouštědel a udržitelných metod

Závěr

Navržená metoda poskytuje efektivní, spolehlivou a rychlou separaci 16 kanabinoidů
Agilent 1260 Infinity II LC systém s DAD detekcí a dobře definovaným protokolem splňuje požadavky na kvalitu
Metoda je vhodná pro laboratorní testování, vývoj produktů i regulační kontrolu

Reference

1. ElSohly M., Gul W. Constituents of Cannabis Sativa, in Handbook of Cannabis, Pertwee R., Oxford University Press, 2014
2. Hillig K. W., Mahlberg P. G. A Chemotaxonomic Analysis of Cannabinoid Variation in Cannabis (Cannabaceae), Am. J. Bot. 2004, 91, 966–975