Expanding the Cannabinoid Target List for a Rugged HPLC Potency Method

Význam tématu

Non-psychotropní kanabinoidy nacházejí širší medicínské využití díky analgetickým, protizánětlivým, antikonvulzivním a dalším terapeutickým účinkům. Přesná, rychlá a robustní analýza jejich obsahu v rostlinných vzorcích, extraktech i hotových preparátech je klíčová pro zajištění kvality, bezpečnosti a efektivity léčiv i doplňků stravy.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo rozšířit existující HPLC metodu Shimadzu Cannabis Analyzer for Potency™ z původního stanovení 11 kanabinoidů na celkem 18 sloučenin. Autoři prezentují optimalizovaný postup, který udrží čas analýzy do 30 minut, zatímco zároveň zajistí vysokou přesnost, opakovatelnost a linearitu pro všechny cílové kanabinoidy.

Použitá metodika a instrumentace

Pro stanovení kanabinoidů byla využita integrovaná HPLC soustava Shimadzu Cannabis Analyzer for Potency™ s UV-Vis detektorem nastaveným na 220 nm. Analýza proběhla na sloupci Shim Pack XR-ODS II (75×3,0 mm, 2,2 µm) za následujících podmínek:

• Mobilní fáze A: 0,085 % kyselina fosforečná ve vodě
• Mobilní fáze B: 0,085 % kyselina fosforečná v methanolu
• Gradient: 60 % B (5 min) → 72 % B (11 min) → 95 % B (6 min) → 60 % B (8 min)
• Průtok 1,0 mL/min, teplota kolony 50 °C, objem injekce 5 µL

Kalibrace byla prováděna na šesti úrovních (0,5–85 mg/L) se sedmi opakováními a třemi QC standardy (2,5; 25; 75 mg/L). Lineární regrese vykázala R2 ≥ 0,9996, opakovatelnost RSD < 1 % a přesnost v rozsahu 98–103 %.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda umožnila plnou chromatografickou separaci všech 18 kanabinoidů za méně než 30 minut. Kalibrace pro jednotlivé sloučeniny prokázala vynikající linearitu a opakovatelnost. Aplikace na reálné vzorky odhalila:

• Dle stanovení v suché květině celkový obsah CBD až 94,4 % hmotnostních a THC 3,36 % hmotnostních.
• U komerční tinktury s deklarovaným 500 mg CBD naměřeno 637,8 mg CBD ve 10 mL (RSD < 1 %).

Výsledky jsou v souladu či nad úrovní deklarací výrobců, což potvrzuje spolehlivost navržené metody pro QA/QC i výzkumné účely.

Přínosy a praktické využití metody

Robustní a relativně rychlá HPLC metoda umožňuje:

• Komplexní kvantifikaci širokého spektra kanabinoidů v různých matricích (květy, oleje, tinktury).
• Zajištění souladu výrobků s legislativními limity a farmaceutickými standardy.
• Podporu vývoje nových kanabinoidových formulací a standardizaci analytických postupů v průmyslu.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozšíření metody o méně běžné kanabinoidy a jejich metabolity, integrace s hmotnostní spektrometrií pro vyšší selektivitu a aplikace v metabolomice. Automatizace přípravy vzorků a online propojení s databázemi by mohly dále zrychlit a zjednodušit rutinní analýzy.

Závěr

Navržená HPLC metoda na platformě Shimadzu Cannabis Analyzer for Potency™ představuje účinný, přesný a reprodukovatelný nástroj pro stanovení 18 kanabinoidů. Díky vysoké citlivosti a spolehlivosti uspokojí požadavky farmaceutického i potravinářského sektoru na kontrolu kvality a dávkování kanabinoidových produktů.

Reference

Pittcon Conference & Expo Virtual Event, March 8–12, 2021