Analysis of Amino Acid Content in Commercially Available Supplements

Význam tématu

Rostoucí popularita energetických doplňků vyžaduje spolehlivé metody sledování obsahu aminokyselin pro zajištění bezpečnosti a přesnosti označení výrobků. Prekurzorová derivatizace minimalizuje rušivé vlivy matrice a usnadňuje kvantifikaci jednotlivých aminokyselin.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem bylo vyvinout a ověřit prekolonovou derivatizační metodu založenou na 6-aminochinolyl-N-hydroxysuccinimidyl karbamátu (AQC) v kombinaci s reverzní fází LC a UV detekcí s podporou hmotnostní spektrometrie pro kvantitativní stanovení aminokyselin v různých formách energetických doplňků. Studie zahrnovala čtyři komerčně dostupné produkty: tabletu a tři práškové směsi.

Použitá metodika a instrumentace

• Přístup: prekolonová derivatizace AQC
• Přístroje: Arc HPLC a ACQUITY Arc UHPLC
• Kolony: AccQ Tag Ultra C18, 2,5 µm, 4,6 × 150 mm
• Detektory: UV (260 nm) a qDa pro potvrzení interferencí
• Mobilní fáze: kombinace eluentů AccQ Tag Ultra A a B a voda
• Podmínky: gradientní eluce, teplota kolony 43 °C pro hydrolyzáty a 50 °C pro potraviny
• Standardy: Waters Cell Culture a Food & Feed Standard Kit, norvalin jako interní standard

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda prokázala, že celkový obsah aminokyselin ve všech čtyřech vzorcích odpovídá deklarovaným 5000 mg na porci. Identifikace koeluce glutamátu a citrulinu pomocí hmotnostní spektrometrie umožnila úpravu chromatografických podmínek a dosažení optimální separace kritických párů. Úpravou teploty kolony a gradientu eluce byly potlačeny interferenční signály a zajištěna reprodukovatelnost výsledků.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí spolehlivou kvantifikaci jednotlivých aminokyselin v komplexních maticích doplňků. Je vhodná pro rutinní QA/QC kontrolu v potravinářském i farmaceutickém průmyslu. Prekolonová derivatizace zkracuje dobu analýzy a snižuje maticové interferenční efekty.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Automatizace přípravy vzorků a derivatizace
• Využití vysokorozlišovací MS pro širší databázi interferencí
• On-line monitoring procesů pomocí vestavěných analytických systémů
• Adaptace metody na další třídy biogenních aminů a peptidů

Závěr

Popsaná metoda poskytuje robustní a přesný postup pro analýzu aminokyselin v energetických doplňcích. Výsledky potvrzují shodu s deklarovanými hodnotami a demonstrují potenciál pro širší aplikace v potravinářské a farmaceutické analýze.

Reference

• Miro Smriga International Regulations on Amino Acid Use in Foods and Supplements and Recommendations to Control Their Safety Based on Purity and Quality Journal of Nutrition 150 2602S–2605S 2020
• Ashley Roberts The Safety and Regulatory Process for Amino Acids in Europe and the United States Journal of Nutrition 146 Suppl 2635S–2642S 2016
• Amino Acid Standard Kits Care and Use Manual Waters Care and Use Manual 72000663EN
• Kenneth D Berthelette Instrument Considerations for Reliable Amino Acid Analysis Using AccQ Tag Ultra C18 2,5 µm Column Application Note 720007678EN Waters 2022