Parallel analysis of drug product for assay and related substances determination

Význam tématu

V moderních farmaceutických laboratořích je nezbytné zvládnout vysoký objem analýz co nejefektivněji. Souběžné stanovení obsahu účinné látky a příbuzných nečistot zkracuje dobu uvolnění produktu a snižuje riziko chyb při opakovaném přípravě vzorků či mobilních fází. Dual-channel (U)HPLC systémy, jako Thermo Scientific Vanquish Duo for Dual LC, umožňují významné zvýšení propustnosti bez navyšování počtu přístrojů a bez navýšení plochy na laboratorních stolech.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem aplikace bylo demonstrovat paralelní provedení analýz metforminu hydrochloridu v tabletách pro stanovení obsahu (assay) a určení příbuzných látek (related substances, RS) na jednom přístroji. Studie srovnává výkonnost běžného HPLC provozu na dvou nezávislých cestách vůči sekvenčnímu zpracování na jednom kanálu a zdůrazňuje přínosy z hlediska produktivity i kvality výsledků.

Použitá metodika a instrumentace

Byla použita isokratická chromatografie na koloniích C18 (Phenomenex HyperClone BDS C18, 250 × 4,6 mm, 5 µm) při teplotě 30 °C s mobilní fází 90 % 10 mM sulfovaný sodný + NaCl pufru (pH 3,85) a 10 % acetonitrilu. Detekce probíhala UV zářením při 218 nm.
Pro přípravu standardů a vzorků byly definovány následující roztoky:

• Standardní a citlivostní roztok metforminu
• Standardní roztok 1‐cyanoguanidinu
• Roztoky vzorků z tablet pro assay i RS
• Placebo a blank pro zajištění specificity metody

Instrumentace:

• Vanquish Flex Duo for Dual LC systém (dvě zcela nezávislé pumpy, sampler, detektory UV, dva sloupové inkubátory)
• Thermo Scientific Chromeleon 7.2.10 CDS pro akvizici a zpracování dat

Hlavní výsledky a diskuse

Assay metforminu:

• Tailing factor ≤1,61, počet teoretických desek ≥16 800, RSD plochy ≤0,05 %, RSD RT ≤0,01 %
• Obsahy ve třech vzorcích: 97,1 %, 97,4 % a 98,2 %

Related substances:

• LOD/LOQ metformin 0,02 %/0,04 % (w/w), 1‐cyanoguanidin 0,004 %/0,008 % (w/w)
• SST: RSD plochy ≤10 %, tailing ≤2,0
• Všechny jednotlivé neznámé impurity < 0,1 %, součet < 0,2 %

Paralelní běh obou metod vedl k dvojnásobné propustnosti bez prodloužení celkového času analýzy a s úsporou laboratorních kapacit.

Přínosy a praktické využití metody

• Dvojnásobná produktivita při analýzách bez navyšování přístrojových kapacit
• Centrální příprava elučních pufrů a vzorků pro oba kanály – úspora času a redukce chyb
• Optimální využití laboratorního prostoru
• Snížení provozních nákladů a snazší servisní kontrakty

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření paralelních analýz na další farmaceutické sloučeniny a matice
• Souběžné použití různých typů detektorů (UV, CAD, MS) pro komplexní profilování vzorků
• Automatizovaná validace a robustnost metod napříč oběma kanály
• Integrace s LIMS a pokročilou datovou analýzou pro vyšší míru digitalizace laboratorních procesů

Závěr

Implementace Vanquish Duo for Dual LC umožnila paralelní provedení assay i related substances analýz metforminu v tabletách na jednom přístroji. Výsledkem byly vysoké reprodukovatelné parametry, dodržení požadavků SST i významné zvýšení průchodnosti laboratoří.

Reference

• Thermo Fisher Scientific (2022) Brožura Vanquish Duo UHPLC Systems BR72623