Automated UHPLC method development and robustness test for mebendazole and related impurities

Význam tématu

Rychlá a systematická automatizace vývoje U(H)PLC metod výrazně zkracuje dobu, náklady i pracovní zátěž v analytických laboratořích. Vývoj robustní metody pro stanovení léčiva mebendazolu a jeho souvisejících nečistot je klíčový pro splnění požadavků ICH na přesnou kvantifikaci a separaci API od nežádoucích vedlejších složek.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo ukázat workflow plně automatizovaného vývoje UHPLC metody pro mebendazol a jeho nečistoty včetně: scoutingové fáze, optimalizace gradientu, teploty a průtoku, a testu robustnosti metody. Metoda byla dokončena a ověřena za pět pracovních dnů s celkovou dobou analýzy 12 minut.

Použitá metodika a instrumentace

Pro automatizovaný vývoj byla použita sestava Thermo Scientific Vanquish Flex UHPLC s Quaternary Pump, Diode Array Detector a modul Automated Viper Method Scouting. Software ChromSword Chromeleon Connect integrovaný s Chromeleon CDS 7.3 zajišťoval scouting, rapidní a jemnou optimalizaci a Plackett-Burman design pro robustnost. Použité kolony zahrnovaly zejména Hypersil GOLD (100×2,1 mm, 1,9 μm).

Hlavní výsledky a diskuse

1. Scouting: Vyhodnocena kritéria počtu špiček, rozlišení (Rs ≥1,5), špičkové tvary. Hypersil GOLD byla vybrána pro další optimalizaci.
2. Rapidní optimalizace: Multikrokový gradient zajišťoval baseline separaci všech nečistot do 13 min, kritické páry špiček měly Rs >3,15.
3. Jemná optimalizace: Lineární gradientní profil, průtok 0,8 mL/min, pH 4,7, 90 % acetonitrilu pro zajištění přenositelnosti a robustnosti.
4. Test robustnosti: Plackett-Burman design ukázal stabilní provozní oblasti ±1,5 % organického podílu, ±2 °C a ±0,1 pH se zachováním Rs >1,8.

Přínosy a praktické využití metody

• Výrazné zkrácení doby vývoje metody až o desítky hodin.
• Snížení manuálních zásahů a variability mezi uživateli.
• Vysoká reprodukovatelnost a snadná přenositelnost mezi laboratořemi.

Budoucí trendy a možnosti využití

Automatizované platformy se stávají standardem pro vývoj chromatografických metod, zejména v farmaceutickém průmyslu a QA/QC. Dalším směrem je integrace umělé inteligence pro predikci parametrů, adaptivní metody učící se z dosavadních dat a cloudová spolupráce mezi laboratořemi.

Závěr

Ukázaný workflow s Thermo Scientific Vanquish a ChromSword Chromeleon Connect umožnil rychlou, spolehlivou a plně automatizovanou UHPLC metodu pro analýzu mebendazolu a jeho nečistot. Systematický přístup minimalizoval čas vývoje i požadavky na obsluhu, přičemž výsledná metoda splňuje náročné požadavky ICH.

Reference

• © 2022 Thermo Fisher Scientific Inc. All rights reserved.