Determination of Carbendazim and Benomyl Residues in Oranges and Orange Juice by Automated Online Sample Preparation Using TLX-LC-MS/MS

Význam tématu

Monitoring reziduí fungicidů carbendazimu a benomylu v citrusových plodech a ovocných šťávách je klíčový pro zajištění souladu s legislativními limity a ochranu zdraví spotřebitelů. Regulace FDA stanovuje akční limit 0,01 mg/kg pro karbendazim v pomerančové šťávě, zatímco EU povoluje maximální reziduální limity (MRL) u pomerančů do 0,2 mg/kg.

Cíle a přehled studie

Cílem metodiky bylo vyvinout rychlou, vysoce propustnou a automatizovanou proceduru pro stanovení celkových reziduí carbendazimu a benomylu v pomerančích a pomerančové šťávě. Studie představuje adaptaci online TLX-LC-MS/MS postupu (Transcend TLX system s TSQ Quantum Access MAX) založeného na TurboFlow technologii a nahrazuje náročný manuální QuEChERS protokol.

Použitá metodika a instrumentace

Sample preparation:

• Úprava pH vzorku na hodnotu 7 přidáním amoniaku (35 %).
• Odvážení 0,5 g vzorku do 2 mL mikrozkumavky, přidání interního standardu (d4-imidacloprid) a 990 µL methanolu.
• Vortexace 5 min, odstředění při 5000 rpm po dobu 5 min.
• Online čištění a koncentrace TurboFlow Cyclone MCX-2 kolonkou a analytická separace na Hypersil GOLD kolonce.
• Detekce v SRM režimu na TSQ Quantum Access MAX, polarita pozitivní, optimalizované přechody pro cílové analyty.

Instrumentace:

• Transcend TLX system (TurboFlow Technology).
• TSQ Quantum Access MAX triple quadrupole MS.
• Turbulent flow kolona Cyclone MCX-2 (50 × 0,5 mm).
• Hypersil GOLD analytická kolona (150 × 4,6 mm, 5 µm) se strážnou kolonkou.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosáhla LOQ 0,0005 mg/kg a LOD 0,00015 mg/kg, což významně překračuje požadavky FDA. Lineární kalibrace v rozsahu 0–0,1 mg/kg s koeficienty determinace >0,989. Rekovere se pohybovaly mezi 96–115 % (RSD <15 %) a opakovatelnost i mezidenní přesnost byly pod 10 %. Matrix efekt byl zanedbatelný (deviace <20 %). Studie stability ukázala přeměnu benomylu na carbendazim během 2 h, což vyžaduje rychlou analýzu. Analýza reálných vzorků z EU nevykázala rezidua nad LOQ.

Přínosy a praktické využití metody

Automatizace online přípravy šetří čas a laboratořní práci, umožňuje zpracování až 100 vzorků denně a redukuje riziko chyb při manuálních krocích. Metoda je vhodná pro rutinní monitoring reziduí v potravinářských a kontrolních laboratořích.

Budoucí trendy a možnosti využití

Metoda může být rozšířena na širší spektrum pesticidů a matrice (obiloviny, dětská výživa, víno), dále integrací do multi-residuálních analýz. Vývoj nových stacionárních fází a optimalizace gradientu zvýší citlivost a selektivitu.

Závěr

Popsaná TLX-LC-MS/MS metoda přináší robustní, citlivé a vysoce automatizované stanovení karbendazimu a benomylu v pomerančích a pomerančové šťávě. Splňuje legislativní požadavky a nabízí významné zrychlení a zefektivnění oproti tradičním QuEChERS postupům.

Reference

1. Webový portál RASFF EU.
2. FDA Food Safety Response Center: akční limit carbendazimu v pomerančové šťávě.
3. Thermo Fisher Scientific Application Note Method 522133.
4. Commission Directive 2002/63/EC L187/30.
5. AOAC Official Methods and Single Laboratory Validation Guidelines.
6. Harmonized Guidelines for Single Laboratory Validation of Methods of Analysis.
7. European Commission SANCO pesticide legislation.
8. Mallat E, Barcelo D, Tauler R. Chromatographia 46 (1997) 342–350.