Extraction of THC and its Metabolites from Human Nail Samples Using ISOLUTE® SLE+ Prior to UPLC-MS/MS Analysis
Aplikace | 2020 | BiotageInstrumentace
Nehty jako biologická matrice poskytují dlouhodobou stopu užití omamných látek a představují méně invazivní alternativu k krvi či moči. Detekce THC a jeho metabolitů v nehtech může napomoci forenznímu i klinickému vyšetřování.
Cílem bylo vyvinout a validovat efektivní postup pro extrakci Δ9-THC, THC-COOH, THC-OH, THCAA, CBD a CBN z lidských nehtových vzorků s využitím mikropulverizace a podporované kapalné extrakce ISOLUTE SLE+.
Metoda dosahuje čistých extraktů s průměrnými obnovami >75 % pro sloupky (a >70 % pro destičky) a RSD <10 % pro všechny analyty. LLOQ se pohybují pod 10 pg/mg nehtu, pro THCAA až 0,02 pg/mg. Kalibrační křivky vykazují vynikající linearitu (r2 >0,999).
Prezentovaná metoda kombinuje účinnou mikropulverizaci a podporovanou kapalnou extrakci, což vede k rychlému, citlivému a reprodukovatelnému stanovení THC a jeho metabolitů v lidských nehtech.
Příprava vzorků, Spotřební materiál, LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
ZaměřeníForenzní analýza a toxikologie, Klinická analýza
VýrobceShimadzu, Biotage
Souhrn
Význam tématu
Nehty jako biologická matrice poskytují dlouhodobou stopu užití omamných látek a představují méně invazivní alternativu k krvi či moči. Detekce THC a jeho metabolitů v nehtech může napomoci forenznímu i klinickému vyšetřování.
Cíle a přehled studie
Cílem bylo vyvinout a validovat efektivní postup pro extrakci Δ9-THC, THC-COOH, THC-OH, THCAA, CBD a CBN z lidských nehtových vzorků s využitím mikropulverizace a podporované kapalné extrakce ISOLUTE SLE+.
Použitá metodika
- Mikropulverizace: sušené nehty rozdrceny v Biotage Lysera s ocelovými kuličkami.
- Extrakce: přidání kyseliny mravenčí v methanolu s interními standardy, rotace a centrifugace.
- Podporovaná kapalná extrakce: aplikace extraktu na ISOLUTE SLE+ sloupky nebo 96-well destičky, eluace MTBE.
- Odpaření: vysušení extraktů na TurboVap LV nebo SPE Dry-96.
- Rekonstrukce: rozpuštění v mobilní fázi pro UPLC-MS/MS.
Použitá instrumentace
- Biotage Lysera pro mikropulverizaci vzorků
- ISOLUTE SLE+ 400 µL sloupky (p/n 820-0055-B) a 96-well destičky (p/n 820-0400-P01)
- TurboVap LV / SPE Dry-96 pro odpařování extraktů
- Shimadzu Nexera X2 UHPLC se kolonkou Restek Pinnacle DB Biphenyl
- Shimadzu 8060 Triple Quadrupole MS s ESI rozhraním
Hlavní výsledky a diskuse
Metoda dosahuje čistých extraktů s průměrnými obnovami >75 % pro sloupky (a >70 % pro destičky) a RSD <10 % pro všechny analyty. LLOQ se pohybují pod 10 pg/mg nehtu, pro THCAA až 0,02 pg/mg. Kalibrační křivky vykazují vynikající linearitu (r2 >0,999).
Přínosy a praktické využití metody
- Rychlá a jednoduchá příprava vzorků bez emulzí
- Vysoká citlivost a reprodukovatelnost analýzy
- Možnost sériového zpracování v 96-well formátu
- Využití v forenzní, klinické a QA/QC laboratoři
Budoucí trendy a možnosti využití
- Adaptace na další semipevné matrice (vlasy, kůže)
- Automatizace procesů pro větší propustnost
- Rozšíření spektra analyzovaných látek
- Integrace s novými MS technikami pro vyšší citlivost
Závěr
Prezentovaná metoda kombinuje účinnou mikropulverizaci a podporovanou kapalnou extrakci, což vede k rychlému, citlivému a reprodukovatelnému stanovení THC a jeho metabolitů v lidských nehtech.
Reference
- Biotage Application Note AN929, 2020
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.
Podobná PDF
Extraction of THC and its Metabolites from Human Hair Using ISOLUTE® SLE+ Prior to UPLC-MS/MS Analysis
2019|Shimadzu|Aplikace
Application Note AN919 Extraction of THC and its Metabolites from Human Hair Using ISOLUTE SLE+ Prior to UPLC-MS/MS Analysis | Page 1 ® Extraction of THC and its Metabolites from Human Hair Using ISOLUTE SLE+ Prior to UPLC-MS/MS Analysis ®…
Klíčová slova
gap, gapisolute, isolutesle, slethc, thcbiotage, biotagelysera, lyseraair, airdispense, dispensepause, pauseflow, flowupper, upperdispensation, dispensationaspiration, aspirationrate, rateformat
Streamlined Sample Preparation of a Drugs of Abuse Panel in Human Nails Using ISOLUTE® SLE+ Prior to UPLC-MS/MS Analysis
2016|Shimadzu|Aplikace
Application Note AN916 Streamlined Sample Preparation of a Drugs of Abuse Panel in Human Nails | Page 1 Streamlined Sample Preparation of a Drugs of Abuse Panel in Human Nails Using ISOLUTE SLE+ Prior to UPLC-MS/MS Analysis ® Analytes Benzodiazepines…
Klíčová slova
gap, gapisolute, isolutesle, slepause, pauseair, airbiotage, biotageflow, flowdispense, dispensenails, nailsupper, uppertriazolam, triazolamdispensation, dispensationketamine, ketaminefentanyl, fentanylaspiration
Streamlined Sample Preparation of a Drugs of Abuse Panel in Human Hair Using ISOLUTE® SLE+ Prior to UPLC-MS/MS Analysis
2018|Shimadzu|Aplikace
Application Note AN897 Streamlined Sample Preparation of a Drugs of Abuse Panel in Human Hair | Page 1 Streamlined Sample Preparation of a Drugs of Abuse Panel in Human Hair Using ISOLUTE SLE+ Prior to UPLC-MS/MS Analysis ® Opioids Cocaine…
Klíčová slova
micropulverization, micropulverizationtriazolam, triazolamketamine, ketaminefentanyl, fentanylalprazolam, alprazolamnor, norisolute, isolutehair, hairmethadrone, methadronesle, slegravity, gravitymethamphetamine, methamphetaminecocaine, cocainebze, bzeflow
Extraction of a Comprehensive Steroid Panel from Horse Hair Using ISOLUTE® SLE+ Prior to LC/MS-MS Analysis
2019|Shimadzu|Aplikace
Application Note AN921 Extraction of a Comprehensive Steroid Panel from Horse Hair Using ISOLUTE SLE+ | Page 1 ® Extraction of a Comprehensive Steroid Panel from Horse Hair Using ISOLUTE SLE+ Prior to LC/MS-MS Analysis ® Sample Preparation Procedure Format…
Klíčová slova
boldenone, boldenonetrenbolone, trenboloneisolute, isolutesle, slehair, hairprogesterone, progesteronelysera, lyseraanalytes, analytesextraction, extractiondht, dhtdhea, dheaaldosterone, aldosteronecorticosterone, corticosteroneandrostenedione, androstenedionecortisone
