High-Speed Analysis of Methylated Catechin

Význam tématu

Methylované katechiny z čaje patří k biologicky aktivním sloučeninám s antioxidačními a protizánětlivými účinky. Rychlá a spolehlivá chromatografická analýza těchto látek je klíčová pro vědecký výzkum, kvalitu čaje a průmyslovou kontrolu surovin.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout vysokorychlostní reverzně-fázovou HPLC metodu pro separaci a kvantifikaci methylovaného katechinu EGCG3"Me ve vzorcích zeleného čaje. Metoda měla nabídnout krátkou dobu analýzy, ostré eluce a reprodukovatelnost.

Použitá metodika

Metoda využívá gradientní reverzně-fázovou chromatografii na C18 sorbentu. Postupně se zvyšuje podíl nepolární fáze, čímž se dosahuje rozlišení mezi polárními a méně polárními katechiny během 7,5 minuty.

Použitá instrumentace

• HPLC systém Nexera X3
• Kolona Shim-pack GIST-HP C18 (75 mm × 3,0 mm, 3 μm)
• Průtok: 1,0 mL·min⁻¹
• Mobilní fáze A: 0,2 % kyselina fosforečná ve vodě
• Mobilní fáze B: methanol/acetonitril (18:5, v/v)
• Gradientní program: 23 % B (0–3,00 min) → 70 % B (3,01–5,00 min) → 23 % B (5,01–7,50 min)
• Teplota kolony: 40 °C
• Objem injekce: 4 μL

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda umožnila plné rozlišení methylovaného katechinu EGCG3"Me od dalších katechinů v rámci 7,5 minuty. Eluční špičky byly úzké, s dobrou opakovatelností retention times. Gradientní profil zajistil optimální retenci i selektivitu separace.

Přínosy a praktické využití metody

• Výrazné zkrácení doby analýzy pro vysoce průtokové laboratoře
• Vysoká reprodukovatelnost vhodná pro rutinní QA/QC
• Aplikace v terénu farmakologického výzkumu čajových polyfenolů
• Možnost rozšíření na screening dalších methylovaných derivátů

Budoucí trendy a možnosti využití

Metoda lze rozšířit o hromadné spektrální detektory (MS) pro strukturální charakterizaci. Výhledově se očekává integrace s automatizovanými systémy pro metabolomické studie a kvalitativní šlechtění čajových odrůd.

Závěr

Vyvinutá HPLC metoda poskytuje rychlou, selektivní a reprodukovatelnou analýzu methylovaného katechinu EGCG3"Me. Je vhodná jak pro rutinní kontrolu kvality, tak pro pokročilý výzkum biologické aktivity čajových polyfenolů.

Reference

Application News L543 (Shimadzu Corporation), prosinec 2021