Thermo Scientific Analytical UHPLC and HPLC columns

Význam tématu

Analytická kapalinová chromatografie s ultravysoce výkonnými (UHPLC) a klasickými HPLC kolonami představuje základní nástroj pro separaci, identifikaci a kvantifikaci složitých vzorků v biologii, farmacii, potravinářství či environmentální analýze. Volba vhodné kolony a chemie stacionární fáze zásadně ovlivňuje rozlišení, dobu analýzy i citlivost detekce, což je nezbytné pro rychlé a spolehlivé rozhodování v průmyslové i výzkumné praxi.

Cíle a přehled článku

Cílem textu je představit široké portfolio Thermo Scientific UHPLC a HPLC kolon (rodiny Accucore, Hypersil GOLD a Acclaim), demonstrovat principy jejich výběru podle polarity a složitosti vzorku a ukázat příklady aplikace na separaci katechinů. Součástí jsou přehledy stacionárních fází, doporučení pro metody reversed-phase, HILIC, iontovou výměnu i speciální fáze a „quick guide“ pro rychlou orientaci.

Použitá metodika a instrumentace

Pro hodnocení separačních vlastností jednotlivých fází byly využity:

• UHPLC systém Thermo Scientific Vanquish
• Standardní HPLC systémy s UV a MS detekcí
• Kolony Accucore (solid core), Hypersil GOLD (plně porézní) a Acclaim (specializované fáze)
• Reversed-phase metody (C18, C8, C4, RP-MS, aQ)
• Fáze pro aromatické a polární sloučeniny (PFP, Phenyl, HILIC, Biphenyl)
• Mixed-mode a iontově výměnné fáze

Hlavní výsledky a diskuse

Porovnání Accucore, Hypersil GOLD a Acclaim ukázalo, že:

• Solid-core částice (Accucore) poskytují vynikající účinnost a nižší zpětný tlak při rychlém průtoku.
• Hypersil GOLD fáze nabízejí široký rozsah stacionární fáze (C18, C8, aQ, PFP, CN, HILIC) pro univerzální či speciální aplikace.
• Acclaim kolony s vysokým povrchem a specifickými chemickými funkcemi (PA, PA2, Phenyl-Hexyl, mixed-mode) se uplatní při složitých matricích.
• Příklady separace šesti katechinů prokázaly odlišné retenční chování na C18, C8, aQ, PFP, CN a Phenyl stacionárních fázích, kdy polarita, pi-pi interakce a hydrofilní konecování ovlivňují pořadí eluujícího proudu a rozlišení.

Přínosy a praktické využití metody

Díky široké nabídce chemických modifikací a velikostí částic lze optimálně přizpůsobit kolonu:

• pro vysoké rozlišení izomerů a strukturně příbuzných sloučenin,
• pro rychlé screeningové analýzy s vysokým propustným objemem,
• v LC-MS aplikacích pro zvýšenou citlivost a minimální šum,
• pro metodický scouting a validaci v QA/QC laboratořích.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další vývoj směřuje k:

• novým hybridním a povrchově upraveným materiálům se zlepšenou stabilitou ve 100 % vodných eluentech,
• dalšímu zmenšování částic (sub-1 µm) a low-dispersion spojům pro ultra-rychlé separace,
• ekologičtějším mobilním fázím a „green chromatography“,
• automatizaci a umělé inteligenci pro predikci optimální kolony a podmínek,
• mikrofluidním systémům integrujícím přípravu vzorku a separaci v jednom čipu.

Závěr

Portfolio Thermo Scientific Accucore, Hypersil GOLD a Acclaim kolon nabízí komplexní řešení pro výzvy moderní analytické chemie. Správnou volbou stacionární fáze lze dosáhnout optimální rychlosti, rozlišení i citlivosti separací napříč širokou škálou aplikací. Budoucí směřování slibuje další zrychlení, udržitelnost a inteligentní podporu v metodickém vývoji.