Analysis of Estrogens Using a Solid Core HPLC Column

Význam tématu

Analýza estrogenů představuje důležitý prvek v oblasti farmaceutického vývoje, klinické diagnostiky a environmentálního monitoringu. Přesné rozlišení a kvantifikace strukturálně podobných steroidů je nezbytná pro kontrolu kvality hormonálních léčiv, sledování hladin hormonů u pacientů a detekci zbytků estrogenů v odpadních vodách.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem této studie bylo evaluovat schopnosti HPLC kolony Thermo Scientific Accucore Phenyl-X při separaci čtyř aromatických estrogenů (estriol, estradiol, estron, ethinylestradiol) a porovnat je s běžnou C18 fází. Studie demonstruje výkon kolony v izokratických podmínkách a ukazuje rozdíly v retenci a selektivitě.

Použitá metodika a instrumentace

• Chromatografický systém: Thermo Scientific HPLC se sondou s UV detekcí (220 nm)
• Kolona: Accucore Phenyl-X 2,6 μm, 100 × 2,1 mm, teplota 40 °C
• Mobilní fáze: směs acetonitrilu : methanolu : vody v poměru 15 : 40 : 45 (v/v)
• Průtok: 0,40 mL/min, objem injekce 1 µL
• Příprava vzorku: stock roztoky estrogenů 1,0 mg/mL v methanolu, smíšený standard 100 µg/mL

Hlavní výsledky a diskuse

Porovnání separace na fázích Phenyl-X a C18 ukázalo významně vyšší retenci i selektivitu na Phenyl-X. Uspořádání špiček se lišilo ve vztahu k pozici aromatického kruhu: na Phenyl-X byla dosažena základní rozlišení všech čtyř sloučenin, včetně obráceného pořadí eluce estronu a ethinylestradiolu. Vyšší selektivita je připisována specifickým interakcím aromatických kruhů analyzátů s fází kolony.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlejší analýza díky krátké době retence (celková doba pod 5 minut)
• Zlepšená chromatografická účinnost a rozlišení složitých směsí estrogenů
• Možnost integrace do QA/QC procesů ve farmaceutickém průmyslu
• Vhodné i pro environmentální monitoring nízko-koncentrovaných steroidů

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření použití superficially porous fází pro další aromatické sloučeniny, včetně lékových metabolitů a environmentálních mikropolutantů. Kombinace se spektrometrií hmotnosti může dále zvýšit citlivost a selektivitu. Důraz rovněž roste na zelené chromatografii, kde se testují vodoujšší mobilní fáze a nižší spotřeba organických rozpouštědel.

Závěr

Accucore Phenyl-X HPLC kolona prokázala vynikající schopnost separace čtyř aromatických estrogenů v krátkém čase a nabídla unikátní selektivitu oproti standardní C18 fázi. Tato metoda je efektivní nástroj pro farmaceutické a environmentální aplikace.

Reference

1. www.women-health-info.com
2. Dionex.com