Determination of Catechins and Phenolic Acids in Red Wine by Solid Phase Extraction and HPLC

Význam tématu

Analýza polyfenolů a zejména katechinů v červeném víně je klíčová pro hodnocení jeho chuťových, barvivových a antioxidačních vlastností. Tyto sloučeniny ovlivňují organoleptické charakteristiky nápojů i jejich zdravotní přínosy.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo vyvinout rychlou, citlivou a reprodukovatelnou metodu pro kvantifikaci devíti katechinů a fenolických kyselin v červeném víně. Studie demonstruje kombinaci solid phase extraction (SPE) a vysokovýkonné kapalinové chromatografie (HPLC) za použití speciálních sorbentů a fází.

Použitá metodika a instrumentace

• Extraktace: Thermo Scientific HyperSep Retain PEP (200 mg/3 mL), optimalizované mytí při 20 % methanolu a eluace 4×1 mL methanolu s 0,1 % formiovou kyselinou.
• Chromatografie: Accela UHPLC systém s Accucore PFP kolonkou (100 × 2,1 mm, 2,6 µm), gradient mobilní fáze (A: voda+0,1 % FA, B: acetonitril+0,1 % FA), průtok 0,4 mL/min, detekce UV při 280 nm, doba běhu 10 min.
• Standardy: jednotlivé a smíšené standardní roztoky katechinů a fenolických kyselin připravené v matrici vína.
• Spotřební materiál: formiová kyselina, methanol, acetonitril, HPLC voda, pipety Finnpipette, SPE manifold, autosampler vialky.

Hlavní výsledky a diskuse

• Během ~5 min došlo k baseline separaci devíti analyzovaných sloučenin.
• Linearity detekce nad 0,995 pro všechny sloučeniny, rozsah koncentrací 3–55 µg/mL.
• Obnovení (recovery) 89–96 % a přesnost 92–112 % potvrzují vysokou spolehlivost metody.
• Použitá PFP fáze prokázala vynikající selektivitu vůči polárním fenolům na aromatickém jádru.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlý a robustní postup vhodný pro rutinní kontrolu kvality vín a potravinářských surovin.
• Možnost kvantifikace širokého spektra fenolických sloučenin v jedné analýze.
• Jednoduchá příprava vzorků se standardními laboratorními pomůckami a SPE cartridgemi.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření metody na další třídy fenolů a komplexní matrice (ovoce, zelenina, energetické nápoje).
• Integrace s hmotnostní spektrometrií pro identifikaci neznámých fenolů.
• Miniaturizace a automatizace přípravy vzorků pro vysokopropustné laboratoře.
• Green chemistry přístupy: redukce organických solventů, využití obnovitelných sorbentů.

Závěr

Popsaná kombinace SPE na HyperSep Retain PEP a rychlé HPLC na Accucore PFP poskytuje citlivou, přesnou a časově úspornou metodu pro stanovení katechinů a fenolických kyselin v červeném víně. Metoda je vhodná jak pro výzkumné aplikace, tak pro rutinní QA/QC kontrolu.

Reference

• H.S. Lee, B.W. Widmer. Phenolic compounds. In: L.M.L. Nollet (ed.), Handbook of food analysis, Marcel Dekker, 1996, s. 821–894.
• M. del Alamo, L. Casado, V. Hernandez, J.J. Jimenez. J. Chromatogr. A, 2004, 1049, s. 97–105.