Thermo Scientific Dionex UltiMate 3000 BioRS Systems

Význam tématu

Bioanalytická separace makromolekul vyžaduje špičkové chromatografické techniky schopné zajistit vysokou rozlišovací schopnost, citlivost a reprodukovatelnost. Genuine bio UHPLC rozšiřuje možnosti klasické reverzní fáze a nabízí plnou biokompatibilitu i při extrémních pH či vysoké koncentraci solí.

Cíle a přehled studie

Představeným cílem aplikace Dionex UltiMate 3000 BioRS systému je demonstrovat schopnost rychlých, vysoce rozlišených separací peptidů, proteinů, glykanů a dalších biomolekul v různých režimech chromatografie (RP, IEC, HILIC) a jejich plynulé propojení s hmotnostní spektrometrií.

Použitá metodika a instrumentace

• BioUHPLC se zpětnou fází, iontovou výměnou a HILIC
• Pumpy RSLC s tlaky až 1000 bar, průtoky do 8 mL/min
• Biokompatibilní WPS-300TBRS autosampler s Viper spojkami a split-loop injekcí
• Termostatovaná kolona TCC-3000RS (5–110 °C, až 12 sloupců)
• PCM-3000 monitor pH a vodivosti pro optimalizaci gradientů
• Integrované hmotnostní spektrometry Q Exactive, Exactive Plus a Orbitrap Elite
• Software Chromeleon 7 a DCMSLink pro řízení LC–MS pracoviště

Hlavní výsledky a diskuse

• Vysoké chromatografické rozlišení: píková kapacita až 370 při gradientu 30 min na kolóně C18 2,2 µm (2,1×250 mm)
• Extrémně nízké mrtvé objemy díky Viper technologii; zkrácené doby běhu o 75 % při zachování separační účinnosti
• Vynikající opakovatelnost a nízké carry-over u peptidových a MAb vzorků
• Přímá integrace se spektrometry Orbitrap umožňuje simultánní kvantifikaci, potvrzení a objevnou analýzu (SIM, PRM, full-scan HRAM)
• Vysoce selektivní glykanová analýza na kolóně GlycanPac AXH-1 se odlučováním izomerů podle náboje, velikosti a počtu sialových zbytků

Přínosy a praktické využití

• Zvýšená propustnost laboratoře díky ultrarychlým gradientům (< 20 s cykly)
• Robustnost v náročných biochromatografických podmínkách (vysoká sůl, extrémní pH)
• Komplexní řešení pro vývoj metod, QC a charakterizaci bioterapeutik
• Možnost paralelních a tandemových LC pro vysokou produktivitu

Budoucí trendy a možnosti využití

Vývoj se zaměří na ještě vyšší automatizaci metodického vývoje pomocí eWorkflows, rozšíření couplingu s pokročilými Orbitrap systémy a nasazení AI-řízené optimalizace parametrů separace. Integrace s multi-omics platformami učiní BioRS systém centrálním nástrojem moderních biologicko-analytických laboratoří.

Závěr

Thermo Scientific Dionex UltiMate 3000 BioRS představuje ucelené biokompatibilní bioUHPLC řešení, které spojuje špičkové rozlišení, rychlost, robustnost i hladkou integraci s hmotnostní spektrometrií pro analýzu peptidů, proteinů, glykanů i dalších biomolekul.

Reference

Žádné literární odkazy nebyly uvedeny.