Rapid Screening Method for Beta Blockers Using an Advanced Solid Core UHPLC Column and System Combination

Význam tématu

Beta blokátory jsou klíčovou skupinou kardiologických léků zaměřených na modulaci receptorů pro noradrenalin, což významně ovlivňuje léčbu hypertenze, anginy pectoris či srdečního selhání. Efektivní a rychlá chromatografická metoda pro více analytů je v praxi zásadní pro zvýšení průchodnosti laboratoře a zkrácení doby potřebné k vydání výsledků.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo předvést výhody kombinace UHPLC systému Thermo Scientific Vanquish a kolony Accucore Vanquish C18+ (1,5 µm) při rychlé analýze čtrnácti beta blokátorů. Metoda využívá vysokou provozní tlakovou odolnost a minimalizaci extraobalového rozptýlení k dosažení separace v detekčním okně 4,5 minuty a celkové doby cyklu 6 minut.

Metodika

Použitá chromatografická metoda zahrnovala:

• Kolona: Accucore Vanquish C18+, 100 × 2,1 mm, 1,5 µm solid core
• Mobilní fáze A: 20 mM roztok amonného formátu, pH 3,0
• Mobilní fáze B: acetonitril s 0,1 % kyseliny mravenčí
• Gradient: 5–30 % B v 0–3 min, 30–100 % B v 3–4,5 min, návrat na 5 % B a equilibrace do 6 min
• Průtok: 500 µL/min; teplota kolony: 40 °C
• Objem injekce: 2 µL; detekce UV při 270 nm
• Příprava vzorků: primární roztok 1 mg/mL v methanolu, 100 µg/mL pracovní roztok ve vodě

Použitá instrumentace

• Vanquish UHPLC systém (základna, pumpa H, split sampler HT, kolonnička, DAD HL)
• Software: Dionex Chromeleon 7.2 SR2
• Virtuoso Vial Identification System a 2 mL víčka se širokým hrdlem
• Spotřební materiál a reagencie: 18 MΩ voda, HPLC acetonitril, formová kyselina, amonný formát

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda umožnila oddělení všech čtrnácti analyzovaných beta blokátorů v detekčním okně 4,5 minuty s dosažením rozlišení USP > 2,0 pro většinu kritických párů (výjimkou byl pár celiprolol–oxprenolol s 1,53). Relativní standardní odchylka retenčních časů nepřesáhla 0,3 % a pracovní tlak se pohyboval mezi 967 a 1024 bar, přičemž byla potvrzena stabilita a reprodukovatelnost výsledků.

Přínosy a praktické využití metody

• Zrychlení analýzy s délkou metody pod 6 minut
• Vysoká rozlišení a minimální sekundární interakce díky částicím solid core
• Vynikající reprodukovatelnost retenčních časů
• Možnost hromadného screenování více analytů v laboratorní rutinní praxi

Budoucí trendy a možnosti využití

Metoda může být rozšířena na další farmaceuticky relevantní sloučeniny, včetně kombinace s hmotnostní spektrometrií pro zvýšení selektivity. Další možnosti spočívají ve využití nových fází pevných jader, provozu při ještě vyšších tlacích a integraci s automatizovanými systémy pro on-line přípravu vzorků.

Závěr

Kombinace UHPLC systému Thermo Scientific Vanquish a kolony Accucore Vanquish C18+ poskytuje rychlou, robustní a vysoce výkonnou metodu pro screening beta blokátorů s excelentními chromatografickými parametry a vysokou reprodukovatelností.

Reference

Meadows K. Rapid Screening Method for Beta Blockers Using an Advanced Solid Core UHPLC Column and System Combination. Thermo Fisher Scientific Application Note 21178, 2015.