Automated Dried Spot Analysis for Rapid Quantitation of Tramadol and Metabolites

Význam tématu

Terapeutická monitorace tramadolu a detekce jeho metabolitů hraje klíčovou roli v klinické farmacii i antidopingových kontrolách profesionálního sportu. Analýza sušených kapek biologických vzorků nabízí výhody v podobě minimalizace objemu vzorku, snadné přepravy a sníženého rizika kontaminace.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo demonstrovat plně integrovaný a automatizovaný workflow pro kvantifikaci tramadolu, O-desmethyltramadolu a N-desmethyltramadolu v matrikách krev, sérum, moč a slina. Metoda kombinuje Transcend DSX-1 Dried Spot Autosampler s TurboFlow UHPLC-MS/MS analýzou.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky byly připraveny tak, že 6 µl spikovaného materiálu bylo naneseno na DBS kartu a vysušeno při pokojové teplotě. Následně došlo k on-line desorpci pomocí Flow-Through Desorption technologie a čištění TurboFlow kolony. Extrakční kapalina byla 0,1 procenta kyseliny mravenčí, interní standardy byly aplikovány inline. Analytická separace proběhla na biphenyl koloně s mobilními fázemi ammonium formátu v methanolu a vodě.
Instrumentace

• Transcend DSX-1 Dried Spot Autosampler
• TurboFlow UHPLC-MS/MS (TSQ Altis MD)
• Cyclone-P předkolona a biphenyl analytická kolona
• Inteligentní kamera pro kontrolu spotu
• TraceFinder software pro zpracování a kvantifikaci dat

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosáhla lineárního rozmezí 5 až 400 ng/ml s koeficientem R2 vyšším než 0,99 ve všech sledovaných matricích. Preciznost a přesnost byly v celém rozsahu pod 20 procent (RSD a CV), reprodukovatelnost u interního standardu zůstala pod 15 procent i po více než 70 injekcích. Celkový analytický běh včetně přípravy vzorku trval přibližně osm minut.

Přínosy a praktické využití metody

Automatizované řešení umožňuje vysokou propustnost (96 karet najednou), minimalizuje ruční zásahy a riziko kontaminace, nabízí stoprocentní trasovatelnost vzorků a je vhodné pro klinickou terapeutickou monitoraci i antidopingové testy.

Budoucí trendy a možnosti využití

Možné směry dalšího rozvoje metodiky

• Integrace do mobilních odběrových jednotek pro terénní nasazení
• Rozšíření analyzovaného panelu látek o další farmaka a dopingové agens
• Využití umělé inteligence pro prediktivní vyhodnocení komplexních dat
• Miniaturizace a vývoj přenosných platform

Závěr

Automatizované řešení využívající Transcend DSX-1 a TurboFlow UHPLC-MS/MS představuje rychlý, robustní a vysoce průtočný workflow pro analýzu tramadolu a jeho metabolitů v sušených kapkách biologických vzorků, splňující požadavky klinické i antidopingové praxe.

Reference

• Anesth Analg. 2017 Jan;124(1):44-51. DOI:10.1213/ANE.0000000000001683
• Union Cycliste Internationale. Technical rules on tramadol. 2019.
• Drug Test Anal. 2020 Nov;12(11-12):1649-1657. DOI:10.1002/dta.2923