Evaluating the Waters ACQUITY Premier System as a Flexible LC Platform That Can Be Broadly Deployed in Biopharmaceutical Labs

Význam tématu

Analytické laboratoře v biopharmaceutickém průmyslu potřebují flexibilní a vysoce výkonné chromatografické platformy, které zvládnou široké spektrum metod a mobilních fází s vysokou ionickou silou. Tyto vlastnosti jsou klíčové pro charakterizaci a kontrolu kvality bioterapeutik během vývoje a výroby.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo ověřit, zda systém Waters ACQUITY Premier s technologií MaxPeak HPS poskytuje srovnatelný výkon pro iontoměnovou (IEX), velikostně vylučovací (SEC) a hydrofobní interakční chromatografii (HIC) ve srovnání s konvenčními UPLC platformami. Studie kladla důraz na metody s vysokou ionickou silou mobilních fází často používané v biotechnologických laboratořích.

Použitá metodika a instrumentace

Studie porovnávala dvě chromatografické platformy: ACQUITY Premier System s povrchovou úpravou MaxPeak HPS a tradiční ACQUITY UPLC.

• IEX: BioResolve SCX mAb column, gradient NaCl v HEPES pH 6.7.
• SEC: ACQUITY Protein BEH SEC column, izokratická eluce 50 mM Na2HPO4/200 mM KCl pH 6.9.
• HIC: Protein-Pak Hi Res HIC column, gradient amonného sulfátu (2 M).

Hlavní výsledky a diskuse

Ve všech třech technikách dosáhl Premier systém výkonu srovnatelného s konvenčním UPLC. V IEX byly retenční časy, rozlišení a kapacita píků statisticky totožné. Při SEC došlo k 34% zlepšení poměru peak-to-valley u clip fragmentu oproti nativnímu píku, přičemž rozlišení ostatních velikostních variant zůstalo stejné. HIC experimenty prokázaly vysokou opakovatelnost rozdělení proteinových frakcí a odvozených DAR hodnot, které byly na obou platformách statisticky nerozlišitelné.

Přínosy a praktické využití metody

• Flexibilita nasazení širšího spektra chromatografických technik na jediné platformě.
• Možnost přímého přenosu existujících metod bez zásadních úprav.
• Spolehlivá práce s mobilními fázemi vysoké ionické síly.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj se očekává v oblasti integrace multi-modálních povrchových úprav, zvýšení automatizace a využití pokročilé datové analýzy (strojové učení) pro optimalizaci metod. Rozšíření aplikací o další techniky, například afinitní chromatografii či kombinované modality, by mohlo dále zvýšit efektivitu vývoje bioterapeutik.

Závěr

Studie potvrzuje, že Waters ACQUITY Premier System s MaxPeak HPS představuje univerzální a spolehlivou platformu schopnou pokrýt klíčové chromatografické techniky v biopharmaceutickém výzkumu a výrobě, přičemž umožňuje snadný přenos existujících metod.

Reference

• Birdsall R. E. et al. Increasing Chromatographic Performance of Acidic Peptides in RPLC-MS-Based Assays with ACQUITY Premier Featuring MaxPeak HPS Technology. Waters Application Note, 2020.
• Koshel B. M. et al. Improving Recovery and Quantitation of Oligonucleotide Impurities Using ACQUITY Premier with MaxPeak HPS Technology. Waters Application Note, 2021.
• Kellett J. et al. Increasing Recovery of Phosphorylated Peptides Using ACQUITY Premier Technology Featuring MaxPeak High Performance Surfaces. Waters Application Note, 2021.