Veterinary Drug Analysis with Supercritical Fluid Chromatography and Triple Quadrupole LC/MS

Význam tématu

Superkritická fluidní chromatografie v kombinaci s triple kvadrupolovou LC/MS umožňuje rychlou a citlivou detekci veterinárních léčivých reziduí v potravinách a zemědělských vzorcích. Díky použití CO2 jako mobilní fáze se dosahuje nižší viskozity a vyšší difuze, což zrychluje separace a snižuje spotřebu organických rozpouštědel.

Cíle a přehled studie

Studie představuje konfiguraci Agilent 1260 Infinity Analytical SFC Solution propojenou s Agilent 6490 Triple Quadrupole LC/MS pro kvantitativní stanovení osmnácti veterinárních látek. Cílem bylo optimalizovat připojení SFC k MS, provést split proudů a zavést make-up tok pro zlepšení ionizace a dosáhnout LOQ v nižších ppb úrovních.

Použitá metodika

Separace probíhala na koloně ZORBAX Eclipse Plus Phenyl-Hexyl (2.1×150 mm, 1.8 μm) při průtoku CO2 s gradientem metanolu jako modifikátoru. Systém obsahoval dvoustupňový splitter s BPR nastaveným na 290 barů a make-up tok acetonitrilu s kyselinou mravenčí pro zlepšení ESI ionizace. Pro každý analyzát byly vybrány dva MRM přechody s optimalizovanými fragmentorovými napětími a kolizními energiemi.

Použitá instrumentace

• Agilent 1260 Infinity Analytical SFC Solution (SFC Control Module, Binary Pump, Degasser, Autosampler, TCC, DAD, Isocratic Pump)
• Agilent 6490 Triple Quadrupole LC/MS s Agilent JetStream ESI
• Kolona Agilent ZORBAX Eclipse Plus Phenyl-Hexyl, 2.1×150 mm, 1.8 μm
• Software Agilent MassHunter pro akvizici, optimalizaci a kvantitativní analýzu

Hlavní výsledky a diskuse

Osmnáct veterinárních látek bylo separováno během 1 minuty v rámci 3minutového běhu s postrun regenerací. LOQ se pohybovaly mezi 55 a 500 pg/mL, přičemž většina byla pod 200 pg/mL, a LOD typicky pod 150 pg/mL. Retenční časy měly RSD <1 %, oblasti píku RSD mezi 5–17 % a kalibrace vykazovaly linearitu s R2 >0,998.

Přínosy a praktické využití metody

• Zkrácení doby analýzy pro screening veterinárních léků
• Vysoká citlivost pro stopové koncentrace
• Minimální spotřeba organických rozpouštědel
• Univerzální konfigurace vhodná pro QA/QC v potravinářství a zemědělství

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj směřuje k rozšíření cíleného seznamu analytů, integraci SFC s vysokorozlišovacími hmotnostními spektrometry, automatizaci vzorkování a online přípravě vzorků. Kombinace multimólových detektorů a pokročilých akvizičních režimů umožní komplexnější monitorování reziduí.

Závěr

Popsaná konfigurace SFC–MS představuje robustní, rychlý a citlivý přístup pro kvantitativní stanovení veterinárních léčiv s limity kvantifikace v řádu nízkých ppb, vhodný pro rutinní screening i potvrzovací analýzy.

Reference

• Kempe G; Glauner T; Spitzbarth F. Multi-residue screening and confirmation of veterinary drugs in tissue samples by LC-MS/MS with new triggered MRM acquisition. 61st Annual ASMS Conference on Mass Spectrometry and Allied Topics, 2013, Minneapolis, MN.