Determination of Dapsone in Bovine Muscle with Bond Elut QuEChERS and LC/MS/MS

Význam tématu

Dapsone patří mezi sulfonamidová veterinární léčiva, jejichž rezidua v potravinách živočišného původu mohou představovat zdravotní riziko pro spotřebitele. Zajištění citlivého, spolehlivého a rychlého postupu pro kvantifikaci dapsonu v mase je klíčové pro kontrolu kvality a dodržování legislativních limitů.

Cíle a přehled studie

Studie se zaměřila na vývoj a validaci postupu pro stanovení stopových koncentrací dapsonu v hovězím svalstvu pomocí metody QuEChERS pro extrakci a čistění a následnou detekci metodou LC/MS/MS. Cílem bylo dosáhnout limitu detekce v řádu desetin µg/kg a ověřit reprodukovatelnost a výtěžnost analytického postupu.

Použitá metodika a instrumentace

Postup zahrnoval následující kroky:

• Homogenizace hovězího svalstva po předchozím zmrazení a rozmrazení.
• Extrahování 5 g vzorku acetonitrilem za přidání vody a směsi soli z Agilent Bond Elut QuEChERS pro veterinární látky.
• Šetrné protřepání, odstředění a přenos horní vrstvy extraktu do tuby s disperzním SPE adsorbentem.
• Čištění extraktu disperzním SPE, opětovné odstředění, zasušení pod dusíkem a doplnění objemu do 1 mL v poměru acetonitril:voda (1:9).
• Filtrace konečného extraktu membránou 0,2 µm před analýzou LC/MS/MS.

Použitá instrumentace

• Agilent 1260 Infinity LC s Agilent Poroshell 120 SB-C18 (2,1 × 100 mm, 2,7 µm).
• Agilent 6460 Triple Quadrupole LC/MS s ESI+ (Jet Stream).
• Disperzní SPE souprava Agilent Bond Elut QuEChERS pro veterinární látky.
• Membránové filtry 0,2 µm (p/n 5190-5106).

Hlavní výsledky a diskuse

Externí kalibrační křivky vykázaly lineárnost v rozmezí 0,25–5 µg/kg s koeficientem determinace R2 = 0,999. Limit detekce stanovený při poměru signál/šum > 3 byl 0,02 µg/kg. Měření výtěžnosti při třech úrovních obohacení (0,5; 1; 2 µg/kg) dosáhla 78–82 % s relativními standardními odchylkami do 7,6 %. Chromatogramy ukázaly čisté a dobře oddělené píky dapsonu bez interferencí z matrice.

Přínosy a praktické využití metody

Popisovaný postup umožňuje spolehlivě detekovat a kvantifikovat dapsone v mase s vysokou citlivostí a reprodukovatelností. Rychlá příprava vzorku metodou QuEChERS a minimalizace meziproduktových interferencí přispívá k vyšší laboratorní produktivitě a je vhodná pro rutinní kontrolní analýzy potravin.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj metodiky může směřovat k simultánnímu stanovení více veterinárních léčiv v jedné analýze (multi-residue), automatizaci přípravy vzorku a využití vysoce propustných chromatografických systémů. Integrace dat se strojovým učením by mohla dále zvýšit rychlost zpracování a přesnost kvantifikace.

Závěr

Metoda kombinující QuEChERS extrakci a disperzní SPE s vysoce citlivou detekcí LC/MS/MS prokázala vynikající parametry pro stanovení dapsonu v hovězím svalstvu. Nízký LOD, dobrá lineárnost, vysoká výtěžnost a reprodukovatelnost potvrzují vhodnost postupu pro kontrolu reziduí v mase.

Reference

• Agilent Technologies. Determination of Dapsone in Bovine Muscle with Bond Elut QuEChERS and LC/MS/MS. Application Note 5991-4791EN, 2014.