Agilent ZORBAX Rapid Resolution High Definition (RRHD) Columns

Význam tématu

High-definition kapalná chromatografie (UHPLC) představuje klíčovou technologii pro rychlé a vysoce rozlišovací separace širokého spektra analytických vzorků. Vysoká účinnost, krátké dobu analýzy a spolehlivost jsou nezbytné pro moderní laboratoře zabývající se farmacií, potravinářstvím, environmentálními a biotechnologickými aplikacemi.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem textu je představit rozsáhlou řadu Agilent ZORBAX RRHD (Rapid Resolution High Definition) kolonek se zrnky 1,8 µm, jejich konstrukční vlastnosti, rozsah použitelných fází a typické aplikace od malých molekul až po intact proteiny a peptidy. Text popisuje flexibilitu metod, stabilitu pod vysokým tlakem a možnosti škálování mezi různými velikostmi částic.

Použitá metodika a instrumentace

Využity byly UHPLC separace na Agilent 1290 Infinity LC systému až do 1200 bar a toky až 5 mL/min s detekcí UV a LC/MS. Typické metody zahrnovaly:

• Gradientní eluce organicko-vodních fází (0,1–0,2 % kyseliny).
• ESI pozitivní módo pro MS a selektivní extrahované iontové chromatogramy.
• Testy reprodukovatelnosti až 200 injekcí.

Hlavní výsledky a diskuse

Analýzy ukázaly, že RRHD sloupce:

• Umožňují rychlé separace biocidů do jedné minuty s vysokým rozlišením.
• Poskytují odlišení endokanabinoidů a anthokyaninů použitím specifických fází (C18, phenyl, HILIC).
• Rozlišují intaktní proteiny (insulin) a peptidové fragmenty s vysokou účinností a symetrií peaků.
• Prokazují stabilitu a konzistenci retence i tlaku během stovek běhů.
• Umožňují snadné přenášení metod mezi 1,8 µm a tradičními 3,5/5 µm kolonkami při zachování selektivity.

Přínosy a praktické využití metody

Agilent ZORBAX RRHD kolony přinášejí:

• Významné zkrácení doby analýzy.
• Vysoké rozlišení i při zvýšených průtocích.
• Široký výběr fází pro optimalizaci selektivity.
• Kompatibilitu s UHPLC i LC/MS.
• Stabilitu v širokém pH rozsahu (1–11,5) a při zvýšených teplotách.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozvoj povrchových úprav stacionárních fází pro extrémně selektivní interakce, integrace se systémy pro automatizované vzorkování a pokročilou datovou analýzu, stejně jako miniaturizovaná řešení pro vysokopropustné screeningové aplikace.

Závěr

ZORBAX RRHD kolony představují univerzální nástroj pro rychlé a vysoce rozlišovací chromatografické analýzy širokého spektra vzorků. Díky kombinaci robustní konstrukce, rozmanitých fází a kompatibility s UHPLC systémy posouvají hranice efektivity a spolehlivosti laboratorních metod.

Reference

• Agilent pub #5990-7166EN (endokanabinoidy)
• Agilent pub #5990-8470EN (anthokyaniny)
• Agilent pub #5990-8124EN (proteiny a peptidy)
• Agilent pub #5990-4899EN (rychlé biocidy)
• Agilent pub #5991-1435EN (300-HILIC kolony)