Agilent ZORBAX Rapid Resolution High Definition (RRHD) Columns

Význam tématu

Pokročilé UHPLC kolony s vysokým rozlišením představují klíč k rychlým a jednoznačným separacím širokého spektra analytů, od malých molekul až po proteiny a peptidy. ZORBAX RRHD slouží jako inovativní platforma pro laboratoře hledající maximální stabilitu, opakovatelnost a kompatibilitu s vysokotlakými systémy.

Cíle a přehled studie / článku

Text prezentuje vývoj a charakteristiky Agilent ZORBAX Rapid Resolution High Definition (RRHD) kolon, demonstruje jejich výkon na modelech endokanabinoidů, anthokyaninů, proteinů a peptidů a porovnává je s tradičními 3,5–5 μm kolonami.

Použitá metodika a instrumentace

Pro hodnocení kolon byla využita kombinace UHPLC a LC/MS:

• Agilent 1290 Infinity LC: tlaky až 1 200 bar, průtoky 0,3–1,7 mL/min
• MS/MS detekce: Agilent 6410 Triple Quad, ESI pozitivní mód, scan 200–1 000 m/z
• Kolony ZORBAX RRHD: 1,8 μm částice v rozmanitých fázích (C18, C8, C3, diphenyl, phenyl-hexyl, cyano, HILIC)
• Širokopórové 300Å kolony pro intact proteiny a peptidy (300SB-C18, C8, C3, diphenyl, HILIC)

Hlavní výsledky a diskuse

Výsledky demonstrovaly:

• Endokanabinoidy: čtyři C18 RRHD fáze s 1,8 μm částicemi pro jednoznačnou separaci AEA, PEA, 2-AG a OEA.
• Anthokyaniny: phenyl-hexyl fáze zlepšila rozlišení glykozidů a acylglykozidů ve srovnání s alkylovými stacionárními fázemi.
• Proteiny a peptidy: 2,1×50–100 mm 300SB-C18 kolony umožnily analýzu inzulinu (<2 min) a peptidových map s vysokou účinností.
• Monoklonální protilátky: kratší C8/C3/diphenyl kolony poskytly lepší obnovu a rozlišení lehkých a těžkých řetězců po redukci.
• Rychlé biocidy: sedm protimikrobiálních látek bylo odděleno za 0,7 minuty na 2,1×50 mm C18 RRHD koloně.

Přínosy a praktické využití metody

Agilent ZORBAX RRHD kolony nabízejí:

• Vyšší průchodnost a rozlišení: krátké kolony 1,8 μm s tlaky do 1 200 bar
• Snadnou škálovatelnost: kompatibilita s 3,5 a 5 μm metodami pro rychlý převod
• Rozmanitost fází: více než 12 chemických modifikací včetně HILIC a fenylových stacionárních fází
• Vysokou stabilitu: provozní pH 1–11,5 (v závislosti na fázi) a teplotní odolnost

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozšíření aplikací v oblasti proteomiky, glykomiky a vysoce citlivých screeningů malých molekul. Integrace s vysokorychlostními hmotnostními spektrometry a pokročilými software nástroji pro analýzu dat podpoří automatizaci a zefektivnění workflow.

Závěr

ZORBAX RRHD kolony představují komplexní řešení pro UHPLC separace, které spojuje rychlost, opakovatelnost a širokou nabídku stacionárních fází. Jejich implementace ve výzkumu a rutinních analýzách přináší výrazné zkrácení doby analýzy a zvýšení kvality výsledků.

Reference

• Agilent pub #5990-7166EN
• Agilent pub #5990-8470EN
• Agilent pub #5990-8124EN
• Agilent pub #5990-4899EN
• Agilent pub #5991-1435EN
• Agilent pub #5990-9214EN