Shim-pack GIST PFPP Application Analysis of Choline and Acetylcholine

Význam tématu

Analýza cholinu a acetylcholinu je klíčová v biochemii, farmaceutickém výzkumu a klinické diagnostice. Tyto sloučeniny hrají zásadní roli jako neurotransmitery a jejich kvantifikace pomáhá sledovat funkci nervového systému, metabolismus i účinnost léčiv.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout a ověřit rychlou, citlivou a reprodukovatelnou LC/MS/MS metodu pro současnou separaci a kvantifikaci cholinu a acetylcholinu. Aplikace využívá fluoro-fenyl-propyl-silika (PFPP) kolonku Shim-pack GIST-HP pro optimální retenci polárních kationtů.

Použitá metodika a instrumentace

Chromatografické podmínky:

• Kolonka: Shim-pack GIST-HP PFPP (3 µm, 150 × 2,1 mm I.D.)
• Mobilní fáze: A) acetonitril, B) 0,1 % kyseliny mravenčí ve vodě, poměr A/B = 30/70 (v/v)
• Průtok: 0,2 mL/min
• Teplota kolony: 40 °C
• Injekční objem: 1 µL standardního roztoku (100 µg/L cholin, 25 µg/L acetylcholin)
• Detekce: LC/MS/MS (systém LCMS-8030 Plus, ESI pozitivní, metoda SRM)

Hlavní výsledky a diskuse

V rámci aplikace byla dosažena separace obou analyzovaných sloučenin v průběhu 5 minut s ostrými, dobře definovanými píky. PFPP kolonka poskytla vyšší retenci a odlišnění polárních kationtů ve srovnání s klasickými C18 stacionárními fázemi. Metoda prokázala vysokou opakovatelnost retencí i ploch píků.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda je vhodná pro rutinní analýzu v biochemických, farmaceutických a klinických laboratořích. Umožňuje rychlou kontrolu hladin cholinu a acetylcholinu v biologických matricích či farmaceutických přípravcích, přičemž minimalizuje spotřebu mobilních fází a zkracuje dobu analýzy.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Integrace automatizovaných vzorkovačů pro vysoce výkonnou rutinní analýzu.
• Rozšíření použití na multiplexní analýzu dalších neurotransmiterů.
• Kombinace s vysokým rozlišením hmotnostní spektrometrie pro identifikaci metabolit.
• Miniaturizované kapilární systémy pro snížení spotřeby vzorku a reagencií.

Závěr

Popsaná LC/MS/MS metoda s PFPP kolonou Shim-pack GIST-HP nabízí rychlou, citlivou a robustní analýzu cholinu a acetylcholinu. Díky jednoduchým chromatografickým podmínkám a spolehlivé detekci splňuje požadavky na vysoce výkonnou analytiku v různých oblastech aplikace.

Reference

• Shim-pack GIST PFPP Application Note, Shimadzu Corporation.