Shim-pack GIST PFPP Application - Analysis of AminoAcids

Význam tématu

Analýza aminokyselin je klíčová pro mnoho oborů včetně potravinářství, klinické diagnostiky a biochemického výzkumu. Rychlá a přesná kvantifikace 20 proteinogenních aminokyselin umožňuje lepší sledování metabolických procesů, kontroly kvality potravin a vývoj nových farmaceutických přípravků.

Cíle a přehled studie

Tento aplikační list popisuje vývoj a validaci LC-MS/MS metody pro separaci a stanovení dvaceti aminokyselin za použití kolony Shim-pack GIST-HP PFPP a systému LCMS8030 Plus. Cílem bylo dosáhnout krátké analýzy (do 15 min), vynikající selektivity a citlivosti pro standardní vzorky aminokyselin.

Použitá metodika a instrumentace

Metoda kombinuje kapalnou chromatografii s hmotnostní spektrometrií v režimu SRM. Použitá instrumentace:

• Kolona Shim-pack GIST-HP PFPP, 3 μm, 150 × 2.1 mm I.D. (P/N: 227-30890-05)
• Mobilní fáze A: acetonitril; B: 0,1 % kyselina mravenčí ve vodě
• Gradientní program:
  • 0–4 min: 100 % B
  • 4–8 min: přechod na 70 % B (30 % A)
  • 8–15 min: 70 % B
• Průtok 0,2 mL/min, teplota kolony 40 °C, objem injekce 3 μL
• Detekce LC/MS/MS (LCMS8030 Plus, ESI pozit., SRM)

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda umožnila rozdělení všech dvaceti aminokyselin během 15 minut se základní separací jednotlivých analytů a úzkými elucemi. PFPP stacionární fáze poskytla selektivní interakci s aromatickými i hydrofilními aminokyselinami. Detekční limity se pohybují v řádu stovek ng/L, reproducibilita retenčních časů RSD < 1 % a plošných výšek < 5 %.

Přínosy a praktické využití metody

Díky krátké době analýzy a vysoké selektivitě je metoda vhodná pro rutinní stanovení aminokyselin v matricích potravin, klinických vzorcích i farmaceutických přípravcích. Jednoduchá mobilní fáze bez derivatizace snižuje riziko kontaminace a zkracuje čas přípravy vzorků.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj směřuje k automatizaci přípravy vzorků, integraci s vysokorychlostními hmotnostními spektrometry s vysokým rozlišením a aplikaci v metabolomických studiích. Perspektivní je také on-line derivatizace a multi-residuální analýzy komplexních biologických a environmentálních vzorků.

Závěr

Popisovaná LC-MS/MS metoda na kolóně Shim-pack GIST-HP PFPP nabízí rychlý, přesný a reprodukovatelný postup pro analýzu 20 proteinogenních aminokyselin. Vysoká citlivost a selektivita činí metodu atraktivní pro široké spektrum analytických aplikací.