Coupling of GC and LCMS Systems via SICRIT Soft Ionization Source for Sensitive Detection of Nitrosamines

Význam tématu

Detekce nitrosaminů v farmaceutických výrobcích získala vysoký význam po zjištění jejich výskytu v léčivech pro léčbu hypertenze a srdečního selhání. Bezpečnost pacientů a dodržování regulatorních požadavků vyžadují spolehlivé a citlivé analytické metody pro monitorování těchto nežádoucích kontaminantů.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo propojit plynovou chromatografii GC-2030 se spektrometrem LCMS-8050 pomocí měkké ionizace SICRIT® a ověřit kvantitativní detekci sedmi nitrosaminů. Ukázalo se, že využití studené plazmy zajišťuje tvorbu molekulových iontů s minimem fragmentace, což usnadňuje analýzu jak nenasycených, tak polárních sloučenin.

Použitá metodika a instrumentace

Pro separaci a detekci byla použita následující aparatura:

• GC-2030 s programovatelnou teplotou kolony (35 °C až 250 °C)
• LCMS-8050 trifotónový kvadrupólový hmotnostní spektrometr
• Plasmion SICRIT® Ion Source využívající studenou plazmu (1,5 kV, 15 kHz) pro měkkou ionizaci
• Kolona SH-RTX-5MS (30 m × 0,25 mm I.D., 0,25 µm film)
• Režim akvizice MRM se standardními tranzicemi a bez další optimalizace

Příprava standardů probíhala ředěním komerčního roztoku v dichlormetanu na koncentrace od 0,2 do 20 000 ng/ml.

Hlavní výsledky a diskuse

Chromatografická separace sedmi nitrosaminů prokázala dobrou reprodukovatelnost retence a tvaru píků. Pro klíčové analyty byly získány lineární kalibrační křivky s koeficienty R² ≥ 0,998. Limity detekce (LOQ) se pohybovaly v rozsahu 0,2–2 pg na kolonu. Nejčasněji elutující nitrosamin vykazoval širší pík, což lze řešit volbou specializovanější kolony.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí:

• Jednoduché propojení GC a LCMS bez nutnosti zásadní modifikace spektrometru
• Univerzální měkkou ionizaci vhodnou pro široké spektrum látek
• Vysokou citlivost a nízké limity detekce komparabilní s tradičními GC–MS systémy

Tento přístup lze využít v QA/QC laboratořích farmaceutického průmyslu pro rutinní screening a kvantifikaci nitrosaminů.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další optimalizace by se mohla zaměřit na výběr specializovaných GC kolon pro lepší separaci raně elutujících sloučenin. Technologie SICRIT® má potenciál rozšířit se i do netargetovaných analýz a monitoring dalších kontaminantů díky své univerzální schopnosti měkké ionizace.

Závěr

Propojení GC-2030 a LCMS-8050 pomocí Plasmion SICRIT® Ion Source poskytuje efektivní a citlivou metodu pro analýzu nitrosaminů. Bez rozsáhlé optimalizace parametrů bylo dosaženo limity detekce a linearity požadované pro farmaceutické aplikace.

Reference

• FDA U.S. Food & Drug Administration, Combined Direct Injection N-Nitrosodimethylamine (NDMA) and N-Nitrosodiethylamine (NDEA) Impurity Assay by GC/MS
• Shimadzu Application News AD-0199, Determination of Nitrosamine Impurities in Sartan Drug Products by GC-MS/MS Method