Ultrafast Analysis of Gabapentin and Pregabalin in Urine Using the Agilent RapidFire High-Throughput Mass Spectrometry System

Význam tématu

Analýza antikonvulziv gabapentinu a pregabalinu v moči je klíčová pro terapeutické monitorování, toxikologické testování i farmakokinetické studie. Rychlá a spolehlivá metoda s vysokou propustností umožňuje zkrátit dobu odezvy laboratoře a minimalizovat spotřebu vzorku a rozpouštědel.

Cíle a přehled studie / článku

Hlavním cílem bylo vyvinout ultrarychlou, selektivní a citlivou online SPE/MS/MS metodu pro stanovení gabapentinu a pregabalinu v moči s minimální přípravou vzorku. Studie demonstruje využití systému Agilent RapidFire pro významné zrychlení analýzy při zachování přesnosti a přesnosti výsledků ve srovnání s tradičními LC/MS/MS protokoly.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky byly připraveny jednoduchým „dilute-and-shoot“ postupem: do 5 µl moče bylo přidáno 1 ml interního standardu gabapentin-d10, následuje 200násobné zředění vodou a automatizovaná analýza v 96-jamkové destičce.

• Systém Agilent RapidFire 360 s cartridgem E (C18, G9205A)
• Agilent 6460 Triple Quadrupole MS s MassHunter Acquisition a Quantitative Software
• Pumoly: voda + 0,1 % kyseliny mravenčí (Pump 1, 1,5 ml/min), směs methanol/isopropanol/acetonitril + 0,1 % kyseliny mravenčí (Pump 2 1,25 ml/min, Pump 3 1,0 ml/min)
• RF stavy s časováním 600–7 000 ms pro adsorpci, promyto, eluci a regeneraci cartridgu

Hlavní výsledky a diskuse

• Rychlost analýzy 25 s na vzorek (včetně blanku), čímž bylo dosaženo >140 vzorků/h.
• Linearita odpovědi v rozmezí 0,5–100 µg/ml s R2 > 0,995 u obou látek.
• Intraday a interday přesnost 98–107 % a přesnost (CV) < 5 % pro QC standardy (10 a 24/27 µg/ml).
• Vysoká reprodukovatelnost: více než 2 000 sekvenčních injekcí se stabilní odpovědí, CV 1,67 % pro gabapentin, 2,65 % pro pregabalin.
• Minimální carryover díky blanku mezi vzorky – žádné významné pozůstatky na cartridgi.

Přínosy a praktické využití metody

Díky ultrarychlému režimu a jednoduché přípravě vzorku je metoda ideální pro klinické laboratoře, toxikologii i farmakovigilanci. Systém RapidFire šetří čas i chemikálie a umožňuje vysokopropustné skríningy terapeutických látek v biologických matricích.

Budoucí trendy a možnosti využití

Metoda lze rozšířit o další farmakologická nebo toxikologická činidla, integrovat do plně automatizovaných pracovních postupů a spojit s pokročilou analýzou dat řízenou umělou inteligencí. Dalším směřováním je miniaturizace cartridge a on-line monitorování biologických procesů v reálném čase.

Závěr

Vyvinutá metoda využívající Agilent RapidFire High-Throughput MS/MS systém poskytuje rychlou, přesnou a vysoce propustnou analýzu gabapentinu a pregabalinu v moči. Srovnatelná analytická výkonnost s tradičními LC/MS/MS metodami je dosažena při pětinové době analýzy, což otevírá nové možnosti v oblasti klinické a průmyslové analytiky.

Reference

Youssef M., Miller V. P. (2014) Ultrafast Analysis of Gabapentin and Pregabalin in Urine Using the Agilent RapidFire High-Throughput Mass Spectrometry System. Agilent Technologies Application Note 5991-4720EN.