Ultrafast Analysis of Z-Drugs in Urine Using the Agilent RapidFire High-Throughput Mass Spectrometry System

Význam tématu

Analýza hypnotik typu Z-drugs v moči je klíčová v forenzní toxikologii a klinické praxi. Tyto látky (zopiclon, zolpidem, zaleplon) se široce předepisují jako spánková pomůcka, ale mohou ohrozit bezpečnost silničního provozu, práce s rizikovými stroji a představují riziko závislosti. Rychlé a spolehlivé vyšetření moči pomáhá zefektivnit screening a potvrzení expozice těmto lékům.

Cíle a přehled studie

Studie si kladla za cíl vyvinout ultrarychlý průtokový postup pro simultánní stanovení zopiclonu, zolpidemu a zaleplonu v lidské moči pomocí systému Agilent RapidFire/MS/MS. Metoda má nabídnout výrazně kratší cyklové časy (15 s na vzorek) při zachování přesnosti a citlivosti srovnatelné s konvenční LC/MS/MS.

Použitá instrumentace

Byl použit systém Agilent RapidFire 360 integrovaný s trojčtvrťovým hmotnostním spektrometrem Agilent 6460. Pro extrakci vzorků sloužil C4 SPE kartridž (RapidFire Cartridge A). Řízení a vyhodnocení dat probíhalo v softwaru MassHunter (Qualitative, Quantitative a RapidFire Acquisition).

Použitá metodika

Vzorky moči se připravovaly jednoduchým „dilute and shoot“ postupem: vzorek se naředil 50násobně vodou obsahující interní standardy (zopiclon-d4, zolpidem-d6). Následovala krátká centrifugace a přímá analýza na RapidFire/MS/MS. Použila se mobilní fáze s 5 mM formiátem amonným (A), 10 % acetonitrilem (B) a směsí metanol–ethylacetát (C). Objem injekce byl 10 µL.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosáhla lineární kvantifikace ve škále 5–500 ng/mL s koeficientem determinace R2 > 0,995 pro všechny analyty. Intradení i mezidení přesnost a správnost byly lepší než 10 %. Přenos mezí (carryover) byl zanedbatelný (< 0 % po nejvyšší standardní koncentraci). Metoda umožňuje analýzu více než 240 vzorků za hodinu (15 s cyklus) srovnatelně přesně jako tradiční LC/MS/MS, ale při > 10× vyšší rychlosti.

Přínosy a praktické využití metody

Rychlost a jednoduchost přípravy podporují vysokou propustnost forenzních i klinických laboratoří. Metoda je vhodná pro screening i kvantitativní potvrzení přítomnosti Z-drugs, což zkracuje dobu vyšetření a zvyšuje kapacitu testování.

Budoucí trendy a možnosti využití

Ultrarychlé SPE/MS/MS postupy lze rozšířit na další skupiny léčiv a drog v biologických matricích. Integrace s automatizovanými platformami a rozšíření panelu analyzovaných látek mohou dále zvýšit efektivitu forenzní a klinické analýzy.

Závěr

Navržená ultrarychlá metoda na bázi Agilent RapidFire/MS/MS představuje efektivní, rychlý a spolehlivý postup pro stanovení zopiclonu, zolpidemu a zaleplonu v moči. Výrazně zvyšuje throughput laboratoří při zachování analytických parametrů konvenčních LC/MS/MS metod.

Reference

1. Rust K. Y., et al. Detection and Validated Quantification of 21 benzodiazepines and 3 ‘Z-drugs’ in human hair by LC-MS/MS. Forensic Science International, 2012, 215:64–72.
2. Tonon M. A., Bonato P. S. Methods for the analysis of nonbenzodiazepine hypnotic drugs in biological matrices. Bioanalysis, 2012, 4(3):291–304.