Ultrafast Analysis of THCCOOH in Urine Using the Agilent RapidFire High-Throughput Mass Spectrometry System

Význam tématu

Rychlá kvantifikace metabolitů drog v biologických matricích je zásadní pro forenzní toxikologii, klinické a průmyslové aplikace. Metoda umožňuje rychlý screening a minimalizuje dobu odezvy při analýze moči pacienta či podezřelého vzorku.

Cíle a přehled studie

Cílem této studie bylo ověřit schopnost systému Agilent RapidFire High-Throughput MS pro ultrarychlou analýzu 11-nor-9-delta-9-tetrahydrokanabinol-9-karboxylové kyseliny (THCCOOH) v moči, hlavního metabolitu marihuany. Výsledky měly být porovnatelné s tradičními GC/MS a LC/MS metodami při významném zkrácení doby analýzy.

Použitá metodika a instrumentace

Metoda zahrnovala jednoduchou přípravu vzorku, metoda dilute-and-shoot po bazické hydrolýze moči. Pro separaci a přenos analyzátů byla použita SPE kartuše v systému RapidFire.

• Agilent RapidFire 360
• Agilent 6490 Triple Quadrupole Mass Spectrometer
• SPE kartuše E (reversed-phase C8, G9210C)
• Pufry: Buffer A (voda, 10 mM NH4OAc, 0,09 % FA, 0,01 % TFA), Buffer B (50 % metanol, 0,1 % FA), Buffer C (85 % ethylacetát, 15 % isopropanol, 0,09 % FA, 0,01 % TFA)
• Objem injekce: 10 µL; cyklus: cca 12 s
• MS/MS podmínky: teplota plynu 250 °C, průtok 19 L/min, mlžič 45 psi, pomocný plyn 300 °C při 11 L/min, napětí kapiláry 3500 V, nozzle voltage 2000 V
• MRM přechody: THCCOOH 345.2→299 (quantifier), 345.2→193 (qualifier); interní standard THCCOOH-d9 354.1→308.2

Hlavní výsledky a diskuse

Analýza vykázala lineární oblast od 5 do 1000 ng/mL (R2 = 0,995). Intraday a interday přesnost i správnost zůstaly v rozmezí ±15 %, CV < 10 %. Při 2000 následných injekcích byla zajištěna stabilita signálu (CV < 10 %, accuracy ±2 %). Throughput dosahoval více než 240 vzorků za hodinu.

• Lineární rozsah 5–1000 ng/mL, R2 = 0,995
• Přesnost a správnost intraday/interday ±15 %, CV < 10 %
• Stabilita přes 2000 injekcí, CV < 10 %, accuracy ±2 %
• Throughput > 240 vzorků/h

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nevyžaduje složitou předúpravu vzorků ani offline čištění, čímž výrazně šetří čas a náklady. Ultrarychlá analýza umožňuje rychlý screening v forenzních laboratořích, klinické toxikologii a průmyslových QA/QC procesech.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření na další kanabinoidy a drogové metabolity
• Integrace do plně automatizovaných pracovních postupů a LIMS
• Multiplexní monitoring více analytů v jediném běhu
• Využití v klinických studiích, dopingové analýze a průmyslovém testování bezpečnosti

Závěr

Ultrarychlá SPE/MS/MS metoda na Agilent RapidFire systému nabízí spolehlivou, přesnou a vysoce výkonnou analýzu THCCOOH v moči, s cyklem kratším než 15 sekund a throughputem přes 240 vzorků za hodinu. Metoda představuje významný krok vpřed oproti tradičním GC/MS a LC/MS postupům.

Reference

• Michelle Romm, Vaughn P. Miller: Ultrafast Analysis of THCCOOH in Urine Using the Agilent RapidFire High-Throughput Mass Spectrometry System. Agilent Technologies, Inc. Application Note Forensic Toxicology, 5990-9763EN, 2014