Waters Atlantis Columns - APPLICATIONS NOTEBOOK

Význam tématu

Práce se zaměřuje na vývoj a aplikaci inovativních chromatografických kolon Atlantis™ pro zlepšené dělení polárních i nepolárních sloučenin v reverzní fázi (RP) a v režimu hydrophilní interakce (HILIC). Díky kombinaci chemicky stabilních stacionárních fází, kompatibility s LC/MS a odolnosti vůči extrémním poměrům mobilní fáze tyto kolony řeší tradiční problémy s retencí vysoce polárních látek.

Cíle a přehled studie / článku

Hlavním cílem bylo představit dvě nové chemie kolon Atlantis: dC18 se zvýšenou retencí polárních sloučenin v RP a HILIC Silica pro velmi polární bázické látky. Studie ukazuje optimalizaci ligandové hustoty, velikosti pórů a endcapping, zkoumá stabilitu při nízkém pH, prevenci hydrické kolapsu a kompatibilitu s 100% vodnou i organickou mobilní fází. Prezentována je široká škála aplikací od životního prostředí až po farmaceutickou analýzu.

Použitá metodika a instrumentace

Obě chemie byly testovány na HPLC a LC/MS systémech Waters Alliance (2690, 2695, HT 2795) s detektory UV/PDA 2996, ELSD 2420 a elektrochemickým ECD 2465. Pro MS analýzy byly využity zdroje ES+ a ES– na přístrojích ZQ™, Quattro micro™, Quattro Premier™, Quattro Ultima™ a Q-Tof micro™. Pro přípravu vzorků se používaly SPE cartrdidges Oasis® HLB, MCX a MAX. Kolony Atlantis™ jsou dostupné ve velikostech od nano (0,075 mm i.d.) přes mikro (2,1 mm i.d.) až po analytické (4,6 mm i.d.) a přípravné rozměry (10–30 mm i.d.) obohacené o IS™ a OBD™ technologie.

Hlavní výsledky a diskuse

• Atlantis™ dC18: optimalizovaný stacionární fáze s difunkčním vazbovým mostem nabízí vyváženou retenci polárních a nepolárních látek, výborné tvary píků, stabilitu v rozsahu pH 2–7 a odolnost vůči kolapsu v čistě vodné fázi.
• Atlantis™ HILIC Silica: poskytuje komplementární selektivitu k RP, zajišťuje vyšší retenci velmi polárních bází a minimalizuje iontovou supresi na ES I–S zdrojích, protože polární analyty eluují po hydrofobních sloučeninách.
• Obě fáze jsou plně kompatibilní s mobilními fázemi vhodnými pro LC/MS a umožňují přímé připojení k MS bez zřejmého bleedingu a bez nutnosti extrémních reekvilibrací.
• V široké paletě aplikací (pesticidy, antibiotika, vitaminy, aminokyseliny, peptidy, steroidy, antioxidanty) kolony prokázaly vysokou reprodukovatelnost, rychlou metodický vývoj a dlouhou životnost.

Přínosy a praktické využití metody

Nové Atlantis™ kolony snižují časové nároky na vývoj metod, eliminují nutnost dedikovaných kolon pro různé polarity látek a umožňují jediné zařízení provozovat RP i HILIC separace. Ve farmaceutických laboratořích minimalizují iontovou supresi v LC/MS/MS, v environmentálních laboratořích zvyšují citlivost stanovení stopových kontaminantů.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření použití HILIC ve studiích metabolomiky, proteomiky a farmakokinetiky, dále vývoj vícefázových kolon kombinujících RP a iontovou výměnu nebo HILIC pro vícekriteriální selektivitu. Pokračovat bude optimalizace částic s nižším rozměrem pro ultrarychlou chromatografii (UHPLC) a microflow LC/MS.

Závěr

Atlantis™ dC18 a HILIC Silica představují robustní, vysoce výkonné a plně LC/MS kompatibilní stacionární fáze, které řeší dlouhodobé výzvy spojené s retencí polárních sloučenin. Nabízejí univerzální řešení pro široké spektrum aplikací od vysokopropustných skríní až po vysoce citlivé kvantitativní analýzy.

Reference

K nejsou uvedeny specifické literární odkazy.