LC-MS Resource Guide

Význam tématu

Rozvoj kapalinové chromatografie v kombinaci s hmotnostní spektrometrií (LC–MS) patří k nejvýznamnějším pokrokům v analytické chemii. Umožňuje vysoce citlivou detekci, selektivní identifikaci a kvantifikaci širokého spektra látek (léčiva, metabolity, přírodní produkty, znečišťující látky) v náročných matricích. Díky perfektní kompatibilitě UHPLC a MS lze dosáhnout vysokého rozlišení, rychlosti analýz a nízkých detekčních mezí, což je nezbytné pro farmaceutickou, bioanalytickou, environmentální i potravinářskou praxi.

Cíle a přehled článku

Publikace představuje komplexní portfólio součástek a metod pro dosahování reprodukovatelných výsledků v rutinní i pokročilé LC–MS analytice. Soustředí se na výběr kolon, přípravu vzorků, kvalitu rozpouštědel a přísad, certifikované standardy a doplňující příslušenství. Cílem je poskytovat doporučení a ukázky aplikací, které maximalizují výkon LC–MS systémů a zkracují dobu vývoje metod.

Použitá metodika a instrumentace

Analytické sestavy kombinují UHPLC pumpy a kolony s Fused-Core® nebo monolitickými částicemi a citlivé MS detektory (ESI, APCI, ion trap, triple quadrupole, TOF). Základní vybavení:

• Kolony Ascentis® Express Fused-Core® (C18, phenyl, HILIC) pro vysokou rychlost a účinnost při nízkém tlaku.
• BIOshell™ Fused-Core® a Chromolith® monolitické kolony pro biomolekuly a rychlý screening.
• Purospher™ STAR pro vysoce čisté separace s rozsahem pH 1,5–10,5.
• SeQuant® ZIC®-HILIC pro polární a hydrofilní sloučeniny.
• Chiralní fáze CHIROBIOTIC® pro enantiomerní separace.
• Příprava vzorků HybridSPE®-PL pro odstranění fosfolipidů, DPX® a online SPE Supel™ Genie pro plně automatizované čištění.
• Doplňky: kvalitní MS filtry, Low Adsorption lahvičky, autosamplery, vysokotlaké fitinky a deliče průtoku.

Hlavní výsledky a diskuse

Testy ukázaly, že použitím Fused-Core® kolon lze dosáhnout dvojnásobné rychlosti při ekvivalentním tlaku oproti sub-2 µm částicím. Hybridní SPE cartridge a DPX® tipy účinně odstraní >98 % fosfolipidů, což vede ke snížení matrix efektů a vyšší citlivosti. Monolitické kolony Chromolith® zajišťují dlouhou životnost (>10 000 injekcí) a extrémně rychlé separace v rutinním provozu. Kvalita LC–MS rozpouštědel LiChrosolv® a LiChropur® se prokázala nízkou úrovní rušivých signálů ve srovnání s konvenčními grade, což je klíčové pro UHPLC metodiky.

Přínosy a praktické využití metody

Implementace těchto nástrojů vede ke zkrácení času vývoje metod, zvýšení robustnosti analýz a lepší reprodukovatelnosti. Široká nabídka kolon a přípravných postupů umožňuje flexibilní přístup pro farmaceutické analýzy, klinický screening, environmentální monitoring i potravinářskou kontrolu. Certifikované referenční standardy a interní standardy Cerilliant® zaručují sledovatelnost a dodržení legislativních požadavků.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další vývoj směřuje k miniaturizaci a integračním řešením, jako jsou mikro- a kapilární kolony, on-line vzorkovací automaty a pokročilé ionizační techniky (MALDI, DESI). Roste význam HRAM-MS (high resolution accurate mass) pro neznámé metabolity, biomarkery a screening nelegálních látek. V oblasti vzorkové přípravy se očekává rozšíření digitálních a robotických platforem pro vysokopropustné prostředí.

Závěr

Komplexní portfólio osvědčených kolon, postupů pro vzorkovou přípravu, čisticích kroků, kvalitních rozpouštědel a standardů umožňuje vědcům dosahovat konzistentních a citlivých výsledků v LC–MS analytice. Publikované příklady aplikací demonstrují provozní robustnost i překlenutí výzev spojených s potlačením matrix efektů a potřebou vysokého rozlišení.

Reference

• Karas M., et al. Int. J. Mass Spectrom., 78 (1987) 53–68.
• Hillenkamp F., Peter-Katalinic J. (eds.), MALDI MS. Wiley-VCH (2007).
• Aebersold R., Mann M. Nature, 422 (2003) 198–207.
• Dreisewerd K. Chem. Rev., 103 (2003) 395–425.
• Santa T. Biomed. Chromatogr., 25 (2011) 1–10.