Screening for Cannabinoids Using the Waters Forensic Toxicology Application Solution with UNIFI

Význam tématu

Analýza kanabinoidů v moči je klíčová pro forenzní toxikologii a testování na pracovištích, protože konzumace konopí je nejrozšířenější nelegální drogou. Určitý metabolit Δ-9-tetrahydrokannabinolu (cTHC) se vylučuje převážně močí jako volná kyselina nebo β-glukuronid. Spolehlivá detekce a kvantifikace těchto sloučenin je nezbytná pro stanovení expozice a dodržování právních norem.

Cíle a přehled studie

Hlavním cílem bylo rozšířit Waters Forensic Toxicology Application Solution s platformou UNIFI o negativní ionizaci (ESI–) pro screening a kvantifikaci kanabinoidů v moči pod současnými limity EWDTS (50 ng/ml pro cTHC). Studie zahrnovala porovnání výsledků s validovanou UPLC-MS/MS metodikou.

Použitá metodika

Vzorky moči byly připraveny jednoduchou pěti-násobnou ředicí extrakcí s acetonitrilem a interním standardem (deuterovaný cTHC). Chromatografické podmínky: ACQUITY UPLC HSS C18 kolona (2,1×150 mm, 1,8 µm), gradient H2O/ACN s 0,001 % kyseliny mravenčí, teplota kolony 50 °C, objem injekce 10 µl, doba běhu 7,5 min.

Použitá instrumentace

• ACQUITY UPLC I-Class (FTN)
• Xevo G2-S QTof Mass Spectrometer
• Maximum Recovery Vials

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda detekovala cTHC a cTHC-glukuronid s limity pozitivní identifikace 12,5 resp. 6,25 ng/ml. Linearity byla v rozsahu 0–500 ng/ml s korelačním koeficientem ≥0,995. Ze 26 autentických vzorků bylo cTHC pozitivně detekováno ve 11 případech a cTHC-glukuronid ve 16 případech, což plně koresponduje s UPLC-MS/MS daty. Výsledky na referenčních kontrolách Bio-Rad odpovídaly deklarovaným hodnotám.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlý screen a semi-kvantifikace kanabinoidů nad/pod prahovými hodnotami v rutinních laboratořích
• Jednoduchá příprava vzorku bez náročné extrakce
• Vysoká citlivost a selektivita díky negativní ESI a vysokému rozlišení QTof

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozšíření aplikace je možné o nové metabolity a syntetické kanabinoidy. Vhodné využití v dopravní toxikologii, dopingových kontrolách a v emergentních analýzách nových psychoaktivních látek. Integrace s LIMS a automatizovaná data processing rozšíří provozní efektivitu.

Závěr

Rozšíření UNIFI založené na negativní ionizaci nabízí robustní screening i semi-kvantifikaci kanabinoidů v moči pod stanovenými limity, s výbornou liniaritou, citlivostí a srovnatelností s UPLC-MS/MS. Metoda je vhodná pro rutinní forenzní a pracovní testování.

Reference

1. Dewey WL. Cannabinoid Pharmacology. Pharmacol Rev. 1986;38(2):151–178.
2. Pallente S, et al. Synthesis and Characterization of Glucuronides of 5’-Hydroxy-delta-9-THC and 11-Hydroxy-delta-THC. Drug Metab Dispos. 1978;6(4):389–395.
3. Wood M. The Utility of MS E for Toxicological Screening. Waters Tech Brief. 2010.
4. Forensic Toxicology Screening. Waters Brochure. 2013.
5. Roberts M, Wood M. Analysis of Beta-Blockers Using UPLC with Accurate Mass Screening. Waters App Note. 2014.
6. EWDT Society guidelines. http://www.ewdts.org (2015).
7. Lee R, Wood M. Using UPLC-MS/MS for Workplace Drug Testing. Waters App Note. 2014.