Using UPLC-MS/MS for Workplace Drug Testing

Význam tématu

Pracovní testování drog je klíčové pro zajištění bezpečnosti v odvětvích jako doprava, jaderná bezpečnost či stavebnictví. Imunoanalytické skríningy často postrádají potřebnou specifičnost a vedou k falešným pozitivním výsledkům. Využití UPLC-MS/MS umožňuje přesnější, citlivější a rychlejší detekci drog a jejich metabolit v moči.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem bylo vyvinout jednoduchou a robustní UPLC-MS/MS metodu pro analýzu 21 nejčastějších látek sledovaných v rámci pracovního testování drog. Spektrum zahrnuje opiáty, amfetaminy, kokain, kanabinoidy, metadon, buprenorfin a jejich glukuronidové metabolity.

Použitá metodika a instrumentace

• Vzorky: 0,2 mL moči se smísí s interními standardy, odvíří, odstředí a naředí vodou v poměru 1:3.
• Chromatografie: ACQUITY UPLC BEH C18, 2,1 × 100 mm, 1,7 µm; gradient formiátového pufru a acetonitrilu, tok 0,4 mL/min, teploty kolony 40 °C a autosampleru 10 °C, objem injekce 8 µL, doba analýzy 7 minut.
• Hmotnostní spektrometrie: Xevo TQD s elektrospray ionizací, polarita přepínaná, zdroj 150 °C, desolvace 500 °C, monitoring MRM přechodů pro každou látku.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda vykázala limity detekce (LOD) v rozmezí 0,25–2 ng/mL a limity kvantifikace (LLOQ) 0,5–5 ng/mL. Kalibrační křivky byly lineární až do 500 ng/mL (resp. 250 ng/mL pro glukuronidy) s korelačním koeficientem r² > 0,995. Maticové efekty byly u většiny látek nižší než 20 %. Mezidenní přesnost i vytížení spolehlivosti QC vzorků bylo <15 % RSD. Validace na 114 autentických mořích a referenčních QC ukázala plnou shodu s výsledky GC-MS a odhalila případy nízkých koncentrací pod stropy imunoassay testů.

Přínosy a praktické využití metody

• Vyšší specifičnost s minimem falešných pozitiv oproti imunoassay.
• Rychlá analýza jednoho vzorku za 7 minut a jednoduchá příprava ředěním.
• Možnost skrínovat široké spektrum látek v jediném běhu.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření panelu sledovaných látek o nové psychoaktivní substance a jejich metabolity. Další automatizace datové analýzy a propojení s laboratorními informačními systémy zvýší propustnost a efektivitu rutinního provozu.

Závěr

Navržená UPLC-MS/MS metoda představuje robustní, citlivý a vysoce specifický přístup pro screening a semi‐kvantitativní stanovení 21 klíčových látek v moči. Splňuje požadavky na rychlost, efektivitu a přesnost v rámci pracovního testování drog.

Reference

1. Kazanga I. et al. Prevalence of drug abuse among workers: Strengths and pitfalls of the recent Italian workplace Drug Testing legislation. Forensic Science International. 2012;215(1–3):46–50.