The Lowesr Near Zero Carryover

Význam tématu

Vysoká úroveň čištění vzorkové cesty a jehly v autosamplerech je klíčová pro minimalizaci přenosu reziduí mezi po sobě jdoucími analýzami. Nízké carryover umožňuje přesné sledování stopových sloučenin, zvyšuje reprodukovatelnost výsledků a zefektivňuje pracovní postupy v laboratoři.

Cíle a přehled studie / článku

Studie hodnotila nové řešení autosampleru Nexera SIL-30AC v boji proti carryover. Byly testovány tři modelové sloučeniny (kofein, chlorhexidin, desipramin a amitriptylin) při různých protokolech oplachu, aby se kvantifikoval zbytkový přenos do následujících injekcí.

Použitá metodika a instrumentace

Analýzy byly provedeny ve dvou režimech:

• UHPLC-UV: kolona ODS 2,0×100 mm, 1,8 µm; mobilní fáze metanol/voda (20/80); průtok 0,4 mL/min; T=40 °C; detekce UV 272 nm; objem injekce 55 µL.
• LC-MS: kolona ODS 2,1×100 mm, 1,8 µm; gradient formiokyselina 0,1 %/acetonitril–voda (25/75 → 50 % → 90 % → 25%); průtok 1,5 mL/min; T=40 °C; ESI(+), přístroj LCMS-2020; inj. objem 55 µL.

Různé kombinace oplachů zahrnovaly:

• dip rinse (ponoření jehly)
• pump rinse (vnější oplach jehly)
• internal rinse (vnitřní oplach jehly)
• injection port rinse (oplach portu injektoru)

Hlavní výsledky a diskuse

Test kofeinu (4 g/L) vykázal carryover pouhých 0,0004 % v první post‐blank injekci, ve druhé již nebyl detekován.
Chlorhexidin (2 g/L), navzdory své adhezivitě, nebyl po plném protokolu oplachu detekován (<0,003 %).
U směsi desipraminu a amitriptylinu (5 mg/L) bylo při kombinaci dip + pump + internal + port rinse eliminováno carryover pod meze detekce (<0,0042 %; <0,0027 %). Při použití pouze dip‐opla chu zůstalo 0,0098 % pro desipramin a 0,0078 % pro amitriptylin. Bez oplachu se carryover pohybovalo kolem 0,05 %.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje spolehlivé stanovení stopových látek bez falešně pozitivních příspěvků z předchozích vzorků. Zrychluje přechod mezi vzorky, minimalizuje potřebu manuálního čištění a zvyšuje průchodnost laboratorních sekvencí.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se širší nasazení pokročilých protokolů oplachu v automatizovaných systémech pro komplexní matice. Další vývoj směřuje k optimalizaci spotřeby rozpouštědel, adaptaci na mikro‐ a nanoobjemy a integraci s vysokorozlišovacími detektory.

Závěr

Nový systém oplachu autosampleru Nexera ukázal vynikající schopnost eliminovat carryover i u vysoce adhezivních sloučenin. Kombinace více druhů oplachu zajišťuje stoprocentní reprodukovatelnost a spolehlivost výsledků UHPLC-UV i LC-MS analýz.

Reference

• LAAN-A-LC-E228: Nexera Application Data Sheet No. 4, Shimadzu Corporation, October 2010.