Analysis of Lipids in a NAFLD Model Mouse

Význam tématu

Výzkum lipidů v modelech nealkoholické steatózy jater (NAFLD) je zásadní pro pochopení patofyziologických mechanismů a hledání nových terapeutických cílů. Hmotnostní spektrometrie a zobrazovací MS umožňují detailní rozlišení a lokalizaci změn v lipidovém profilu v závislosti na indukci oxidačního stresu prostřednictvím AAPH.

Cíle a přehled studie

Cílem této studie bylo porovnat změny lipidových složek v jaterních homogenátech a tenkých řezech modelových myší s NAFLD po jednorázové aplikaci AAPH (90 mg/kg) vůči kontrole ošetřené PBS. Pro analýzu byly kombinovány kvantitativní a zobrazovací přístupy hmotnostní spektrometrie.

Použitá metodika a instrumentace

Homogenáty jater byly analyzovány pomocí LCMS-IT-TOF v rozsahu m/z 500–1500 v pozitivním i negativním režimu. Pro zobrazení distribuce lipidů v řezech o tloušťce 10 µm byly použity:

• iMScope (m/z 600–1000, rozlišení 50 µm, matrix 1,5-diaminonaphtalen)
• AXIMA Confidence (m/z 500–1000, rozlišení 20 µm, matrix 1,5-diaminonaphtalen)

Hlavní výsledky a diskuse

Multivariační analýza (PCA, OPLS-DA) homogenátů odhalila osm lipidových signálů se signifikantními změnami (m/z 780–832) po podání AAPH. Zobrazovací MS potvrdila jejich lokalizované akumulace a umožnila detekci dalších lipidů ve stejném rozsahu m/z. Komparace výsledků z iMScope a AXIMA ukázala rozdíly v citlivosti a spektrální odezvě obou přístrojů.

Přínosy a praktické využití metody

Kombinace kvantitativní LCMS-IT-TOF a zobrazovacích přístupů poskytuje ucelený obraz biochemických změn a prostorového rozložení lipidů v tkáních. Tento přístup přispívá k akceleraci objevu biomarkerů, sledování farmakokinetiky a vývoji cílených léčiv pro onemocnění jater.

Budoucí trendy a možnosti využití

Rozvoj vysokého prostorového rozlišení, hybridních hmotnostních spektrometrů a integrace strojového učení obohatí zobrazovací MS v metabolomice. Očekává se lepší identifikace biomarkerů, detailnější mapování změn v tkáních a zrychlení preklinického výzkumu.

Závěr

Prezentovaná studie demonstruje synergii mezi LCMS-IT-TOF a zobrazovacími systémy iMScope a AXIMA Confidence při analýze lipidů v modelu NAFLD. Metoda umožňuje komplexní kvantifikaci a lokalizaci lipidových změn, což je klíčové pro pochopení mechanismů onemocnění a podporu vývoje nových léčiv.

Reference

1. Free Radic. Res. 38:375–384 (2004)
2. Anal. Chem. 80(23):9105–9114 (2008)
3. Anal. Chem. 84(4):2048–2054 (2012)