Quantitative Analysis of Flavonols in Tea Leaves

Význam tématu

Flavonoly představují významnou skupinu polyfenolů v čajových listech s antioxidačními a biologickými účinky. Jejich přesná kvantifikace podporuje hodnocení nutriční hodnoty a funkčních vlastností potravinářských a zemědělských produktů.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem bylo vyvinout jednoduchou, rychlou a přesnou HPLC metodu pro simultánní stanovení glykozidů a aglykonů hlavních flavonolů v čajových listech dvou odrůd (Yabukita, Benifuuki) bez nutnosti chemické hydrolýzy.

Použitá metodika a instrumentace

Metodika:

• 250 mg drcených vzorků čajových listů extrahováno 20 mL 80% methanolu
• Ultrazvuková extrakce po dobu 30 minut
• Centrifugace při 2 000×g po dobu 5 minut, následné ředění supernatantu 1:10 vodou
• Filtrace membránovým filtrem a přímá analýza HPLC

Instrumentace:

• HPLC systém Nexera X3 (Shimadzu)
• Kolona Shim-pack GIST C18 (150×4,6 mm, 3 µm)
• Mobilní fáze A: 0,1% kyselina mravenčí ve vodě, B: acetonitril; gradient 15→95→15 % B
• Průtok 1,0 mL/min, teplota kolony 40 °C, objem injekce 10 µL
• Detekce UV při 370 nm

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosáhla vynikající linearity (R2 ≥ 0,997) pro koncentrace 0,1–20 µg/mL a opakovatelnosti RSD ≤ 3,33 %. Chromatogramy standardů i vzorků prokázaly dobrou separaci osmi flavonolů. Analýza odhalila u Yabukita vyšší obsah rutin, hyperosidu a izokvercitrinu ve srovnání s Benifuuki, kde byly koncentrace těchto sloučenin nižší a některé flavonoly pod mezí kvantifikace.

Přínosy a praktické využití metody

Navržená HPLC metoda eliminuje nutnost hydrolýzy, zkracuje dobu zpracování vzorků a snižuje náklady. Vhodná je pro rutinní kontrolu kvality, výzkum potravinové funkčnosti a monitorování stability polyfenolů v potravinářském průmyslu.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj může zahrnovat kombinaci s hmotnostní spektrometrií pro hlubší charakterizaci fenolů, automatizaci vysokopropustných analýz a rozšíření na další potravinářské matrixy s cílem sledovat bioaktivní složky a jejich metabolity.

Závěr

Vyvinutá metoda poskytuje robustní a reprodukovatelný nástroj pro simultánní kvantifikaci klíčových flavonolů v čajových listech. Umožňuje efektivní rozlišení chemického profilu různých odrůd čaje a podporuje kvalitativní i kvantitativní hodnocení produktů.

Reference

1. Monobe et al. Quercetin Glycosides-rich Tea Cultivars (Camellia sinensis L.) in Japan. Food Science and Technology Research. 2015, 21(3), 333–340.
2. Nobuya Shirai. Assay of Flavonol Contents in Tea Leaves and Infusions. Nippon Shokuhin Kagaku Kogaku Kaishi. 2018, 65(7), 357–362.