Waters ACQUITY UPLC and ACQUITY PREMIER CSH Columns

Význam tématu

Analytické chromatografické metody založené na UPLC technologii přinášejí rychlé a vysoce účinné separace v chemickém a bioanalytickém výzkumu i rutinní QA/QC praxi. ACQUITY CSH (Charged Surface Hybrid) kolonky jsou navrženy pro zlepšení tvaru píku, opakovatelnosti a retence základních látek při nízkém pH a nízké iontové síle. Díky speciální hybridní povrchové úpravě poskytují dlouhodobou stabilitu, vysokou kapacitu a vynikající reprodukovatelnost. Integrace inteligentního čipu eCord umožňuje trvalou sledovatelnost parametrů kolony a historii jejího provozu, což zvyšuje spolehlivost výsledků a zkracuje čas strávený papírovou administrativou.

Cíle a přehled dokumentu

Manuál slouží uživatelům k:

• Bezpečné a správné instalaci ACQUITY UPLC a ACQUITY PREMIER CSH kolonek v přístrojích UPLC.
• Optimálnímu nastavení provozních podmínek včetně pH, teploty, tlaku a složení mobilní fáze.
• Zajištění dlouhé životnosti a opakovatelné chromatografické výkonnosti prostřednictvím čištění, regenerace, skladování a používání doplňkových prvků jako VanGuard pre–kolony a VanGuard FIT cartridgí.
• Využití technologie eCord pro sledování výroby, testů a skutečného zatížení kolony.

Použitá metodika a instrumentace

Instalace a příprava:

• Připojení kolony k UPLC systému a postupné vypláchnutí 100 % organickým rozpouštědlem (acetonitril nebo methanol).
• Equilibrace minimálně 10ti objemů kolony zvolenou mobilní fází.
• Určení počáteční účinnosti měřením teoretických destiček a porovnání s certifikací.

Provozní podmínky:

• pH rozsah 1–11 v závislosti na chemii (C18, Phenyl-Hexyl, Fluoro-Phenyl).
• Optimální teploty 20–80 °C, při vysokém pH doporučeno nižší pracovní teplo.
• Maximální tlak 18 000 psi (1241 bar).

Sample–preparation:

• Filtrace vzorků 0,2 µm membránou nebo SPE kartou.
• Příprava vzorku v mobilní fázi nebo jemnější matrici.

Technické doplňky:

• VanGuard Pre–Columns a FIT Cartridges pro ochranu kolony před nečistotami.
• eCord inteligentní čip uchovávající data o batchu a provozní historii.

Hlavní výsledky a diskuse

Požadavky na kvalitu vody, rozpouštědel a přípravu mobilních fází byly stanoveny s cílem minimalizovat usazování bakterií, precipitaci solí a mechanické zanášení. Volba volatile a non–volatile pufrů, jejich optimální koncentrace a doporučené gradienty významně prodlužují životnost kolony. Důsledná údržba, pravidelné čištění a regenerace podle typu kontaminace (polární, nepolární, proteinová) udržuje chromatografickou výkonnost. Technologie eCord poskytuje bezproblémový přístup k dokumentaci kvality a provozní historie, což usnadňuje audit i rychlou diagnostiku problémů.

Přínosy a praktické využití metody

• Zvýšená rychlost analýzy a reprodukovatelnost díky extrémně nízkému systémovému objemu UPLC.
• Vynikající tvar píku pro zásadité látky, nižší retence nežádoucích složek a vyšší citlivost při analýze stopových látek.
• Prodloužená životnost kolony směrem až k tisícům injekcí díky jednoduše vyměnitelným pre–kolonám a vrstvě MaxPeak pro minimalizaci adsorpce.
• Snížení administrativní zátěže a rizika chyb díky eCord e–dokumentaci parametrů a provozních dat.

Budoucí trendy a možnosti využití

Svět analytické chemie směřuje k ještě vyšší automatizaci sledování kolony, online diagnostice pomocí pokročilých senzorů a strojového učení pro predikci životnosti. Vývoj dalších povrchových úprav a hybridních materiálů zlepší biokompatibilitu a rozšíří uplatnění v biofarmaceutickém výzkumu. Digitalizace laboratorního workflow umožní hladší integraci UPLC dat do LIMS a cloudových řešení pro týmovou spolupráci a audity.

Závěr

Správná instalace, nastavení podmínek a údržba ACQUITY UPLC a ACQUITY PREMIER CSH kolonek zásadně ovlivňují analytickou výkonnost a životnost. Volba vhodných pufrů, organických modifierů, teplot a tlaků společně s pravidelnou regenerací a využitím eCord inteligentního čipu zajišťuje spolehlivou chromatografii s minimem provozních potíží. Systémová dokumentace navíc významně zjednodušuje validaci a sledovatelnost výsledků.

Reference

Waters Corporation. Care and Use Manual: ACQUITY UPLC a ACQUITY PREMIER CSH Columns, Rev D, říjen 2020.