ACQUITY UPLC and ACQUITY PREMIER BEH Columns

Význam tématu

Správná péče a používání UPLC kolon ACQUITY BEH a ACQUITY PREMIER BEH je klíčové pro dosažení vysoce reprodukovatelných, citlivých a robustních chromatografických separací. Optimalizace instalace, ekvilibrace, údržby a sledování výkonu kolon přímo přispívá k jejich dlouhé životnosti a spolehlivosti v náročných analytických aplikacích.

Cíle a přehled manuálu

Manuál definuje ucelený soubor doporučených postupů pro:

• instalaci kolony a doplňujícího příslušenství (VanGuard guard kolony, FIT cartridgy),
• ekvilibraci kolony před prvním a mezi jednotlivými běhy,
• stanovení počáteční účinnosti (počet teoretických pater) a následné sledování výkonu,
• čištění, regeneraci a skladování pro maximální prodloužení životnosti,
• využití eCord Intelligent Chip pro digitální sledování historie a parametrů každé kolony.

Použitá metodika a instrumentace

Instrumentace a spotřební komponenty použitá v manuálu:

• Waters ACQUITY UPLC System
• ACQUITY PREMIER BEH Columns (C18, C8, Phenyl, Shield RP18, HILIC, Amide)
• VanGuard Pre-Columns a VanGuard FIT Cartridges pro ochranu analytických kolon
• eCord Intelligent Chip pro ukládání údajů o kolonce (Certificate of Analysis, Performance Chromatogram, provozní údaje)
• Vysokotlaké čerpadlo, termostatická kolonažní jednotka, detektory UV, ELSD a MS dle aplikace

Hlavní výsledky a diskuse

Manuál shrnuje kritická doporučení a výsledky norem kvality:

• Detailní návod na odstranění vzduchu, přípravu mobilních fází a ekvilibraci s 10–50 náplněmi kolony pro stabilní tlak a konstantní návratnost retence.
• Doporučení pH pracovních podmínek: BEH C18/C8/Phenyl 1–12, Shield RP18 a Amide 2–11, HILIC 1–9 a teplotní limity pro zachování integrity chemie BEH.
• Provedení postupů čištění: výměna organických a nepolárních rozpouštědel podle typu kontaminace, regenerace proteinových zbytků (DMSO, guanidin hydrochlorid, gradienty TFA/CH3CN).
• Skladování kolon: reverzní fáze v 100% acetonitrilu, HILIC v 95:5 acetonitril/voda, vždy bez solných pufrů a za dodržení dobré laboratorní praxe.
• Funkčnost eCord čipu: automatické ukládání sériového čísla, dat prvního a posledního běhu, maximálního tlaku a teploty, počtu injekcí a vyhodnocení základní systémové vhodnosti.

Přínosy a praktické využití metody

Implementace doporučených postupů přináší:

• Vysokou reprodukovatelnost retence a účinnosti separace v čase.
• Minimalizaci prostojů v laboratoři díky rychlým a standardizovaným postupům údržby.
• Zvýšení životnosti kolon až o řád při správném čištění, regeneraci a skladování.
• Jednoduché digitální sledování historie kolony pomocí eCord, bez papírových záznamů.

Budoucí trendy a možnosti využití

Rozvoj oblastí kolem UPLC kolon směřuje k:

• Další digitalizaci a integraci s LIMS a cloudovými systémy pro centralizovanou správu dat a okamžité sdílení výkonnostních parametrů.
• Pokročilým povrchovým úpravám (MaxPeak HPS a další technologie) pro snížení adhezivních interakcí a maximální zisk citlivosti.
• Využití vyšších tlaků (>18 000 psi) pro rychlejší separace při zachování účinnosti.
• Automatizované protokoly čištění a regenerace pomocí vestavěných modulů pro omezování manuálních zásahů a lidské chyby.
• Rozšíření pracovních pH a teplot pro náročné biofarmaceutické a environmentální aplikace.

Závěr

Pečlivé dodržování doporučených postupů pro instalaci, ekvilibraci, používání, údržbu a sledování výkonu ACQUITY UPLC a ACQUITY PREMIER BEH kolon významně zvyšuje kvalitu a spolehlivost chromatografických výsledků. Digitalizace správy kolony pomocí eCord čipu přináší efektivní archivaci a kontrolu parametrů v celém životním cyklu kolony.

Reference

• Waters Corporation: Care and Use Manual ACQUITY UPLC and ACQUITY PREMIER BEH Columns, 2020.