New Features of the Agilent Method Scouting Wizard for Automated Method Development of Complex Samples

Význam tématu

Vývoj chromatografických metod je zásadní v oblastech jako farmacie, potravinářství, životní prostředí i chemický průmysl. Zvýšená složitost maticových vzorků a vyšší počet analyzovaných sloučenin vede k výraznému nárůstu času a nároků na vývoj metod. Automatizované nástroje dokážou urychlit vyhledávání ideálních podmínek, minimalizovat zásahy operátora a zajistit konzistentní výsledky.

Cíle a přehled studie

Tato technická přehledová studie demonstruje použití Agilent Method Scouting Wizard v rámci systému Agilent 1290 Infinity II Method Development Solution. Cílem bylo najít optimální chromatografickou metodu pro oddělení 16 pesticidů ve složitém vzorku kombinací až sedmi různých kolón, dvou organických rozpouštědel, tří teplot a nastavení gradientu. Metoda automaticky upravuje průtoky i časy gradientu podle vnitřního průměru a délky kolóny.

Použitá metodika a instrumentace

Instrumentace:

• Agilent 1290 Infinity II Multisampler
• Agilent 1290 Infinity II Flexible Pump
• Dva Agilent 1290 Infinity II Multicolumn Thermostaty s rychlovýměnným ventilem
• Agilent 1290 Infinity II Diode Array Detector
• Agilent 1290 Infinity Valve Drive
• Software Agilent OpenLAB CDS ChemStation Edition s Method Scouting Wizard

Rozpouštědla: voda a metanol nebo acetonitril s přídavkem 0,1 % kyseliny mravenčí. Kolony: různé typy ZORBAX SB C18, C8, Bonus RP a Eclipse Plus C8 v dimenzích od 4,6×50 mm po 2,1×150 mm.

Hlavní výsledky a diskuse

Celkem bylo vygenerováno 42 metod pro scouting a po započítání proplachů a ekvilibrací až 88 sekvenčních kroků. Data z metod byly hodnocena pomocí bublinových grafů i tabulkových přehledů Summary Performance Report. Optimální separaci 16 pesticidů poskytla kolóna Eclipse Plus C8 2,1×150 mm s acetonitrilem při 40 °C v čase 30 minut s nejvyšší součtovou rezolucí. Metanolové eluenty vedly k nižšímu počtu detekovaných piků a částečným koelucím. Změna teploty umožnila jemnou úpravu selektivity, kdy některé páry sloučenin byly rozděleny pouze při vyšší či nižší teplotě. Tabulkové reporty usnadnily identifikaci slibných podmínek z rozsáhlého souboru běhů.

Přínosy a praktické využití metody

Agilent Method Scouting Wizard umožňuje rychlý screening velkého množství kolón, rozpouštědel a parametrů bez manuálního programování každé metody. Výrazně zkracuje dobu vývoje, snižuje riziko chyb a podporuje opakovatelnost. Metodu lze aplikovat v rutinních laboratořích pro QA/QC, vývoj nových léčiv i environmentální monitoring.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozvoj automatizace s využitím strojového učení pro predikci optimálních podmínek, integrace online detekce hmotnostní spektrometrií a připojení do cloudových platforem pro správu a sdílení metod. Rozšíření o adaptivní algoritmy by mohlo umožnit samoučící se optimalizaci v reálném čase.

Závěr

Použití Agilent Method Scouting Wizard na platformě 1290 Infinity II prokázalo efektivní a systematický přístup k vývoji metod pro komplexní vzorky. Kombinace automatických úprav průtokových parametrů, teplot a gradientu umožnila rychlou identifikaci optimálních podmínek pro oddělení 16 pesticidů ve složité matici.

Reference

1. Automated Scouting of Stationary and Mobile Phases Using the Agilent 1290 Infinity II Method Development Solution publication number 5991-5679EN 2015
2. The Agilent 1290 Infinity II Multimethod Solution publication number 5991-5934EN 2015