Agilent 1290 Infinity II LC with ISET – Emulation of the Agilent 1100 Series LC Through Waters Empower Software

Význam tématu

Chromatografický přenos metod mezi různými systémy HPLC/UHPLC je kritický pro zachování konzistence výsledků a zrychlení vývoje analýz. Technologie ISET (Intelligent System Emulation Technology) umožňuje bezúdržbový přenos metod z konvenčního HPLC systému Agilent 1100 Series na vysokorozlišující UHPLC Agilent 1290 Infinity II bez změny parametrů metody, což šetří čas, snižuje riziko chyb a usnadňuje validaci napříč platformami.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem této aplikace bylo demonstrovat použití ISET v prostředí Waters Empower 3 s Agilent Instrument Control Framework pro analýzu směsi pěti analgetik. Studie porovnává retence a rozlišení na Agilent 1100 Series Binary LC a Agilent 1290 Infinity II LC provedené s ISET a bez něj. Výsledky ověřují, že emulované metody zachovávají přesnost retencí i rozlišení.

Metodika

Vzorek obsahoval acetamidofen, antipyrin, acetanilid, hydroxyantipyrin a phenacetin v různých koncentracích připravených v aketonitrilu a vodě s 0,1 % kyseliny mravenčí. Chromatografie probíhala na C18 kontrafázové kolóně Agilent ZORBAX RRHD SB (4,6 × 150 mm, 3,5 μm) s gradientem vody (A) a acetonitrilu (B): 0–8 min z 15 % na 50 % B, 8–9 min na 80 % B, doba běhu 10 min, průtok 1,5 mL/min, teplota 30 °C, detekce DAD při 254 nm.

Použitá instrumentace

• Agilent 1100 Series Binary LC: pumpa G1312A, odplyňovač G1379A, autosampler G1313A, termostat G1316A, DAD G1315B.
• Agilent 1290 Infinity II LC: vysokorychlostní pumpa G7120A, multisampler G7167B, multikolonový termostat G7116B, DAD G7117B s 10 mm Max-Light kazetou.
• Software: Waters Empower 3 (build 3471) s ICS 2.1 HF1, Agilent ICF A.02.03 DU1 HF2 a ISET 4 V1.0.

Hlavní výsledky a diskuse

Při přímém přenosu metody bez ISET na UHPLC došlo ke zkrácení retencí o 5–13 % a k odchylkám rozlišení mimo specifikaci (–2 až –45 %). Aktivací ISET byly retence i rozlišení sladěny s původní HPLC metodou na <1 % odchylku, přičemž rozlišení zůstalo v rámci ±5 % povolené tolerance. RT přesnost (RSD) pro osm po sobě jdoucích injekcí byla pod 0,07 % u ISET a pod 0,12 % bez ISET.

Přínosy a praktické využití metody

• Přímé nasazení ověřených HPLC metod na UHPLC systémy bez opětovné optimalizace.
• Zrychlení vývoje a validace metod díky minimalizaci parametrických změn.
• Zajištění konzistence výsledků mezi odděleními a laboratořemi.
• Kompatibilita s třetími stranami, jako je Waters Empower, a snadná integrace do existujících workflow.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření emulace ISET na další chromatografické platformy a integrační nástroje, včetně cloudových řešení a umělé inteligence pro automatizované převody metod. Další možností je využití ISET pro on-line kontrolu kvality v reálném čase, adaptivní úpravy metod při analýze složitých matric a rozvoj miniaturizovaných UHPLC systémů pro vysokokapacitní screening.

Závěr

Technologie ISET v kombinaci s Agilent 1290 Infinity II LC prokázala spolehlivý a bezproblémový přenos chromatografických metod z HPLC systému 1100 Series. Bez nutnosti změny parametrů bylo dosaženo retencí a rozlišení vynikající shody (>99 %) s původní metodou, což významně usnadňuje správu a validaci analytických postupů.

Reference

1. The Agilent Instrument Control Framework (ICF), Agilent Technologies Customer Letter, 5990-5756EN, 2010.
2. Agilent 1290 Infinity with ISET, Agilent Technologies User Manual, G4220-90313, 2014.
3. Huesgen AG. Seamless instrument-to-instrument method transfer from an Agilent 1100/1200 Series LC to an Agilent 1290 Infinity LC using ISET, Agilent Technologies Technical Overview, 5990-9113EN, 2011.