Agilent 1290 Infinity II LC with ISET– Emulation of the Agilent 1100 Series Binary LC for Analysis of Tricyclic Antidepressant Drugs

Význam tématu

Tricyklická antidepresiva jsou klíčové v klinické chemii a forenzní toxikologii pro stanovení hladin neurotransmiterů v biologických vzorcích. Spojování robustních metod HPLC s ultra-výkonnými UHPLC systémy usnadňuje zachování původních analytických protokolů bez ztráty reprodukovatelnosti.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo ilustrovat schopnost technologie ISET v Agilent 1290 Infinity II LC bez nutnosti úprav metod převést analytické procedury pro šest tricyklických antidepresiv z konvenčního Agilent 1100 Series binary LC. Studie porovnávala výsledky měření s ISET aktivovaným a deaktivovaným, hodnotila shodu retenčních časů a přesnost měření.

Použitá metodika a instrumentace

• Systémy: Agilent 1100 Series binary LC (pumpa G1312A, autosampler G1313A, termostat G1316A, DAD G1315B) a Agilent 1290 Infinity II LC (pumpa G7120A, multisampler G7167B, multikolonový termostat G7116B, DAD G7117B)
• Kolona: ZORBAX Eclipse XDB-C18 4.6×75 mm, částice 3.5 µm
• Mobilní fáze: 10 mM uhličitan amonný pH 8 (A) a methanol (B), gradient 60–90 % B v čase 0–10 min, průtok 1 mL/min, teplota 50 °C
• Vzorek: směs protriptylinu, trimipraminu, nortriptylinu, doxepinu, imipraminu a amitriptylinu
• Detekce: 254 nm, referenční 360 nm, odezva 0.5 s

Hlavní výsledky a diskuse

Analýza ukázala posun retenčních časů o 6–9 % při přímém přenosu metod na 1290 II LC bez ISET. Aktivací ISET se shoda vůči původnímu systému zlepšila na více než 99 %, odchylky retenčních časů pod 1 %. Precision (RSD) retenčních časů klesla z průměrných hodnot kolem 0.08 % na 0.006–0.068 % a RSD ploch z 0.07–0.31 % na 0.13–0.16 %.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlý převod stávajících HPLC metod na moderní UHPLC bez časově náročných úprav
• Vysoká přesnost a reprodukovatelnost měření při aktivovaném ISET
• Univerzálnost použití pro různé analytické platformy a typy vzorků

Budoucí trendy a možnosti využití

Implementace ISET otevírá cestu k automatizovanému převodu metod mezi různými LC systémy, včetně nových modelů UHPLC. Dalšími směry jsou aplikace na komplexní bioanalytické a farmaceutické matice, rozšíření o metody pro hmotnostní spektrometrii a integrace se strojovým učením pro optimalizaci analytických protokolů.

Závěr

Technologie ISET v Agilent 1290 Infinity II LC umožňuje bezproblémový převod metod z Agilent 1100 Series binary LC pro analýzu tricyklických antidepresiv s více než 99% shodou retenčních časů a výrazně lepší precizností. To zefektivňuje rutinní provoz laboratoří a zkracuje dobu validace nových metod.

Reference

1. Gratzfeld-Huesgen A. Agilent 1290 Infinity Binary LC with ISET–Emulation of the Waters Alliance 2695 LC System Analyzing Analgesics, Application Note 5991-2792EN, 2013
2. Gratzfeld-Huesgen A. Seamless instrument-to-instrument method transfer from an Agilent 1100/1200 Series LC to an Agilent 1290 Infinity LC using ISET, Application Note 5990-9113EN, 2011
3. Huber U. Analysis of Tricyclic Antidepressant Drugs by HPLC, Application Note 5988-7626EN, 2002
4. Agilent 1290 Infinity II with ISET, User Manual G4220-90314, 2015